SORD在肾透明细胞癌组织中的表达及对786-O细胞增殖、迁移能力的影响

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:njuchen1986
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目的:探讨SORD表达水平与肾透明细胞癌的临床相关性及其对786-O肾透明细胞癌细胞系增殖与迁移的影响。方法:首先,通过免疫组织化学方法明确SORD在我院泌尿外科手术切除的50例肾透明细胞癌及癌旁正常肾组织中的蛋白表达水平。其次,通过实时荧光定量PCR检测组织中SORD mRNA表达,进一步分析SORD的mRNA表达水平与患者年龄、性别、肿瘤大小、病理分期等的临床相关性。然后构建SORD稳定过表达786-O细胞,通过WST-1、克隆形成与BrdU等方法观察细胞增殖能力,采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力。结果:1.SORD在临床肾透明细胞癌中表达下降:免疫组织化学结果显示,在50例肾透明细胞癌组织中SORD蛋白表达水平较癌旁正常肾组织明显降低;实时荧光定量PCR检测SORD的mRNA表达与免疫组化结果一致,采用成组配对t检验统计分析,P<0.0001,具有统计学意义;临床资料分析,SORD mRNA表达与性别、肿瘤大小、临床症状及临床病理分期无明显相关性(p>0.05),而与年龄具有相关性(p<0.05)。2.SORD降低786-O细胞增殖能力:WST-1法检测786-O、786O-NC与786O-SORD 24h吸光度分别为0.16±0.004、0.17±0.003和0.16±0.062,48h分别为0.87±0.024、0.87±0.003和0.56±0.007,72h分别为1.35±0.053、1.35±0.032和0.84±0.006,48h和72h结果显示SORD抑制786-O细胞生长(P<0.01);克隆形成实验,当种植密度300个/孔时,786-O、786O-NC与786O-SORD克隆形成数量分别为106.5±4.95、109.5±6.36与80.5±0.71;种植密度500个/孔时,分别为118.5±2.12、108.5±10.61与83±2.83;两种种植密度均显示SORD减少细胞克隆形成数量(P<0.05;P<0.01);BrdU实验,增殖期细胞占比分别为(66.47±2.45)%、(65.76±1.77)%与(44.39±1.77)%,786O-NC与对照组细胞相比,无统计学差异,而786O-SORD组与对照组、空载组相比增殖均下调(P<0.01,P<0.001)。3.SORD降低786-O细胞迁移能力:786-O、786O-NC与786O-SORD组经划痕24h后,相对迁移率分别为0.55±0.02、0.58±0.05与0.39±0.04,与对照组和空载组相比,结果显示SORD降低786-O细胞相对迁移率(P<0.01);Transwell实验,24h后通过小室的细胞数分别为134.67±12.22、138.33±8.08与102±10.58,空载组与对照组迁移能力无显著性差别,而786O-SORD与对照组相比迁移距离缩短(P<0.05),与空载组比较迁移能力下降(p<0.01)。结论:肾透明细胞癌组织中SORD表达降低;SORD过表达可抑制肾透明细胞癌细胞系786-O的增殖与迁移。
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