目的通过检测As₂O₃作用裸小鼠人肝癌原位移植多药耐药模型后瘤体内与耐药相关的葡萄糖神经酰胺合成酶（GCS）、多药耐药相关蛋白（MRP）及其基因水平的变化,从基因、蛋白质水平多层次探讨As₂O₃体内逆转肝癌多药耐药的机制。方法BEL-7402肝癌细胞在裸小鼠皮下移植成瘤后再原位移植入裸小鼠肝脏,用阿霉素腹腔注射8W诱导耐药,MTT检测原代培养的耐药细胞对抗癌药的耐药性,并培养传代进行体外实验。另将原代耐药肿瘤组织（BEL-7402/ADM）再次原位移植入56只裸小鼠肝脏体内,一周后随机分成五组,①ADM组:腹腔注射ADM 1.5mg/kg;②ADM+ As₂O₃组:腹腔注射As₂O₃(根据LD₅₀的1/15、1/10、1/5,即0.8 mg/kg、1.2 mg/kg、2.4 mg/kg ,又分为低剂量AALow组、中剂量AAMid组和高剂量AAHigh三组),ADM1.5mg/kg;③As₂O₃组:腹腔注射As₂O₃ 1.2 mg/kg;④ADM+CsA组:腹腔注射CsA 2mg/kg, ADM 1.5mg/kg;⑤空白对照组:腹腔注射等体积NS。在肿瘤移植后一周开始给药,As₂O₃连用一周,间歇3周,共用两疗程,ADM和CsA为每周一次,共8周。疗程结束后应用RT-PCR检测各组瘤体内MRPmRNA的表达,应用免疫组化检测GCS的表达情况。结果1,通过八周的诱导耐药裸小鼠肝脏原位肿瘤组织（BEL-7402/ADM）对ADM及CDDP的耐药性分别提高了13.62及12.97倍,而对MMC及5-FU耐药性不明显。2,单独使用ADM或As₂O₃化疗的裸小鼠发生腹水数及腹腔广泛转移数明显高于联合As₂O₃的化疗组（P<0.05）。3,As₂O₃组的抑瘤率为10.68%,ADM组的抑瘤率是22.65%,对于此耐药细胞株,该两种化学药物抑制肿瘤作用差。低、中、高剂量的As₂O₃联合ADM组裸小鼠瘤重明显低于ADM组,CsA组与联合As₂O₃化疗组的抑瘤率（A CsA组:64.96%,A AHigh3组:67.52%,A AMid2组:66.24%,A ALow1:组54.7%）无明显差别（P>0.05）。但较单独使用ADM及As₂O₃有较强的抑制肿瘤作用（P<0.05）。As₂O₃与ADM表现为协同作用, （q=2.14,P=0.015）。4,ADM组的MRPmRNA表达最强,明显高于其他各组。低、中、高剂量的As₂O₃联合ADM组裸小鼠瘤内MRPmRNA的含量明显低于单独使用As₂O₃组及生理盐水组（P<0.01）。而低、中、高剂量的As₂O₃三组之间及单独使用As₂O₃组与生理盐水组之间均无明显差别（P>0.05）。5,免疫组化显示各组裸小鼠瘤体内均有GCS表达,ADM组裸小鼠瘤体内的GCS呈现强阳性表达,与NS组比较亦有区别（P<0.05）。单独使用As₂O₃对肿瘤GCS的表达与生理盐水组无明显差异（P>0.05）。ADM联合As₂O₃化疗后可明显降低瘤体内GCS的表达（P<0.01）,与联合CsA组无明显差异。低、中、高剂量的As₂O₃三组虽然GCS的阳性率不断增大,但是无统计学意义（P>0.05）。结论1,长时间ADM化疗可诱导BEL-7402细胞的耐药性增强,随着使用周期的延长,肿瘤细胞内的耐药基因及蛋白阳性率进一步增高。2, As₂O₃在体内具有较强逆转BEL-7402/ADM瘤体的耐药作用,其机制可能是As₂O₃下调了BEL-7402/ADM细胞MRPmRNA基因的表达,使GCS的表达减弱,从而增强瘤体内的化疗药物浓度,提高了化疗效果。3, As₂O₃在体内表现出较强的逆转肝癌多药耐药性作用,为临床肝癌的化疗提供了一条新的途径。