本试验材料玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63为刘大群教授从美国明尼苏达州马铃薯疮痂病菌自然衰退的土壤中分离到一株生防链霉菌。为了建立玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的遗传转化系统，本论文研究了PEG-介导的原生质体转化、接合转移、电转化等方法的影响因素和转化条件。首先对玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的原生质体制备和再生条件进行了研究，结果表明，菌丝体二级培养有利于原生质体的形成，采用TSB作为一级培养基28℃200rpm摇床震荡培养24h，转接到二级培养基中补加2％的甘氨酸28℃200rpm继震荡培养40h；采用玫瑰黄链霉菌原始培养基、YEME、CRM、R₃、R₂YE、CP、SGGP、GPYP8种培养基中进行二级培养，表明SGGP培养基适合玫瑰黄链霉菌原生质体制备的二级培养。其次，溶菌酶作用浓度为2mg／mL，37℃水浴60min，在此条件下，原生质体的形成量可达到10⁷～10⁸No．／mL。原生质体再生采用常规培养基R₂YE，玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63原生质体再生后产孢能力比较差，考察再生培养基R₂YE的成分及含量对原生质体再生影响的研究表明，Ca²⁺、Mg²⁺是影响原生质体再生的主要因素，R₂YE中Ca²⁺浓度为100mmol／L、Mg²⁺浓度为50mmol／L时，玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63再生数约为4.0×10⁶／mL，再生率可达15％。尝试使用链霉菌通用质粒pIJ702转化玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63原生质体，参照变铝青链霉菌原生质体转化方法不能获得转化子，因此本文研究了影响玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63原生质体转化的因素，结果表明，PEG的来源和浓度是影响转化的主要因素，PEG-4000可以介导玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63原生质体的转化，但是转化率特别低，只有1.5×10^-3％。本文还研究了玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的接合转移和电转化的方法。接合转移研究表明，将具有oriT的大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pKC1139转入大肠杆菌ET12567（pUZ8002）中，获得供体菌ET12567（pUZ8002，pKC1139），将供体菌和预处理过的玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63孢子悬浮液进行混合培养，成功的将pKC1139转入到Men-myco-93-63中去，转化率较高，可达到10³～10⁴转化子／μg pKC1139。电转化在一些植物和动物细胞中应用比较广泛，经电击后外源片断能够很容易的进入细胞。在微生物方面，电转化应用比较少，近年来有关链霉菌的电转化研究有不少成功的例子。试验中参考黑暗链霉菌电转化的条件，电击对象采用玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63原生质体、预萌发的孢子、经溶菌酶处理的菌丝体，转化均没有成功，电转化条件还有待于进一步研究。玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63转化体系的建立为克隆其相关的抗生素生物合成基因及一些相关基因的功能验证奠定了基础。