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目的 EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)是一种致瘤病毒,已证明多种人类恶性肿瘤如Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌、何杰金病和免疫缺陷病人的B淋巴细胞瘤等与EBV感染相关。近年来研究发现约2~16%的胃癌组织EBV DNA阳性,大多数罕见的淋巴上皮瘤样胃癌和少部分常见的胃腺癌组织中均可检测到EBV基因组,且可见于各种病理类型的胃癌如高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌和印戒细胞癌组织中,因此EBV感染与胃癌的发生可能存在某种相关性。本研究应用PCR-Southern和核酸原位杂交技术检测胃癌及相应癌旁组织中EBV以确证EBV相关胃癌,RT-PCR和Southern杂交进一步检测EBV相关胃癌组织中EBV核抗原基因启动子、潜伏期基因和裂解期基因的表达,从分子水平探讨EBV感染与胃癌发生发展的关系。 方法 应用PCR-Southern杂交检测172例胃癌组织和相应癌旁组织中特异性EBV DNA,进一步用原位杂交技术检测PCR阳性标本石蜡切片组织中EBV小RNA(EBER1)的表达,以确证EBV感染。应用RT-PCR和Southern杂交检测EBV相关胃癌EBV启动子Qp、Wp和Cp;潜伏期基因EBNA1、EBNA2、LMP1、LMP2A和LMP2B;裂解期基因BZLF1、BRLF1、BARF1、BHRF1、BLLF1和BcLF1的表达,明确EBV在胃癌组织中的感染状态。 结果 172例胃癌中有11例为EBV相关胃癌,其中9例为低分化腺癌,1例为中分化腺癌,1例为印戒细胞癌,EBV检出率为6.39%,统计学分析表明EBV阳性率与性别、年龄、组织学分型和临床分期之间的差别均无显著性,P值分别为0.069、0.485、0.237和0.151.172例相应癌旁组织中EBV基因组均为阴性,与胃癌组织EBV检测结果比较二者之间的差别具有显著性,P=0.0026.11例EBV相关胃癌中EBV启动子Qp表达阳性而Wp和Cp均为阴性;潜伏期基因EBNA1表达均为阳性,有4例LMP2A表达阳性,而EBNA2、LMP1和LMP2B均为阴性。裂解期基因中即刻早期基因BZLF1有5例表达阳性,而BRLF1均为阴性;早期基因中有5例BARF1表达阳性,2例BHRF1表达阳性;晚期基因BcLF1有7例表达阳性,而BLLF1均为阴性。 结论 ①胃癌组织中EBV阳性率为6.36%,与病人性别、年龄、组织学分 中文摘要型和临床分期之间的差别均无显著性。②相应癌旁组织EBV均为阴性,与胃癌组织EBV阳性率比较二者之间有显著性差异,提示EBV感染与胃癌的发生发展有一定相关性。③EBNAI转录由Qp启动,未检测到EBNAZ、LMPI和LMPZB的表达,但部分EBV阳性标本LMPZA表达阳性,表明EBV相关胃癌组织中病毒潜伏状态介于工型潜伏和11型潜伏之间。④部分EBV相关胃癌中可检测到EBV裂解期基因的表达,表明EBV部分基因在胃癌组织中处于活动状态,但裂解期基因与胃癌发生发展的关系有待于进一步研究。