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酵母是生物产品发酵的主要载体微生物之一,也是重组基因工程产品经常采用的宿主细胞。为提高生产过程的经济性和产品的市场竞争力,生物技术研究者不断创造更经济、更有效的方法,优化生产过程,实现高生产率。酵母细胞的高密度培养是提高酵母表达产品生产水平的重要手段。麦角固醇和谷胱甘肽均为重要的医用品和保健品,前者是合成维生素D2的前体,后者是生物体内重要的还原剂。本实验对酿酒酵母发酵法联产麦角固醇和谷胱甘肽的可行性进行了理论探讨,通过实验给出了一种简单、有效、可行的发酵方案。本文研究了培养基组成及NaN03和氨基酸混合液对发酵产品的影响,并对发酵培养基和发酵工艺作了初步优化,为后续的研究工作奠定了基础。主要工作如下(1)、实验室现有两种酵母菌在相同发酵时间的生物量比较接近,相比之下,T65发酵24小时,麦角固醇的含量在1.89%-1.95%之间,同时谷胱甘肽的含量在1.13%-1.18%之间,均高于Y-E-1。因此确定联产发酵菌株为:T65。(2)、通过正交设计实验确定了联产发酵培养基组成为:葡萄糖60g·L-1,玉米浆44g·L-1,磷酸二氢钾2g·-,硫酸镁3g·L-1,Zn2+12ppm,Fe2+、Cu2+、Mn2+各4ppm。(3)、采用通气量和搅拌转速均匀递增的方法发酵。(4)、葡萄糖采用乙醇控制反馈流加策略。(5)、发酵添加剂为:NaNO3和氨基酸混合液。实验结果表明,在菌体生长旺盛期(发酵前期)添加NaN03,在菌体生长平稳期(发酵中期)添加氨基酸是比较可行的方案。同时根据生物量的变化来确定糖蜜流加的时间和加入量。(6)、考虑到谷胱甘肽合成是一个消耗氮源的过程,因此在流加过程中采用简单氮源如用氨水作为流加碱来调节发酵液的pH在5.5-6.5范围内,这样一来可以极大地促进生物量合成。(7)、发酵后期糖蜜的流加可以为酵母二次生长提供营养物质,起到延长发酵时间,提高产量的目的。通过以上优化方案,我们使两种产物的产量达到了最大化(麦角固醇1121mg·L-1,谷胱甘肽1561m g·L-1,生物量124g·L-1)。具有工业化的前景。