DC-CK1在白血病源树突状细胞中表达的研究

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目的:树突状细胞(dendritic cells,DCs)产生的树突状细胞趋化因子1(dendritic cell-chemokinel, DC-CK1)对启动初始免疫应答发挥关键作用。观察体外诱导的白血病源DCs表达DC-CK1的水平,为白血病免疫治疗的发展寻找新的途径。方法:采集初诊急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(AALL)、慢性粒细胞白血病(CML)患者及健康志愿者外周血,用淋巴细胞分离液密度梯度离心分离单个核细胞(monouclear cells, PBMC),用重组人粒-巨噬核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF) 100 ng/ml、重组人白细胞介素4 (rhIL-4) 100 ng/ml及肿瘤坏死因子a (TNF-α) 50 ng/ml联合培养8天,通过细胞形态学(倒置显微镜、Wright染色)及免疫表型(流式细胞仪)对培养的DCs进行鉴定;荧光原位杂交(FISH)对DCs进行细胞遗传学检测;半定量PCR(RT-PCR)检测各组DCs表达DC-CK1mRNA的水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中DC-CK1的浓度。结果:白血病源DCs与正常DCs形态变化相似,其表面标志表达阳性率与正常DCs之间亦无明显差异(P>0.05)。RT-PCR和ELISA检测显示AML-DCs、CML-DCs及ALL-DsC表达的DC-CK.1mRNA及DC-CK1的水平分别为0.26±0.025、(152.32+34.74)pg/ml,0.27±0.020、(163.06±40.97) pg/ml,和0.29±0.034、(173.80±40.44)pg/ml,均明显低于正常-DCs的0.43±0.032、(325.36±39.23) pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:本实验结果提示:多种细胞因子诱导产生的白血病源DCs其DC-CK1的mRNA水平与蛋白质水平变化趋势一致,均明显低于正常DCs,这就预示白血病源DCs诱导免疫反应的能力降低。通过提高DC-CK1的表达水平,可能有助于加强白血病源DCs与初始淋巴细胞之间的结合,有利于启动免疫反应,以增强白血病源DCs的抗肿瘤效应,对清除微小残留病灶及减少白血病复发具有非常重要的意义。
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