本文旨在以胶原为基本材料,通过壳聚糖改性构建了一种微结构稳定、降解速率适中、生物相容性良好的胶原—壳聚糖真皮支架。在此基础上,进一步仿生模拟人体皮肤的结构与功能,构建了一种具有双层结构的组织工程皮肤支架:胶原—壳聚糖/硅橡胶双层皮肤支架。胶原—壳聚糖/硅橡胶双层皮肤支架由胶原—壳聚糖真皮支架和具有一定厚度的硅橡胶膜通过生物相容性良好的胶粘剂粘结而成。其中胶原—壳聚糖真皮支架层模拟真皮的细胞外基质,原位诱导缺损真皮组织的再生;而硅橡胶层则相当于临时的表皮层,主要为了避免细菌侵入、防止水分蒸发等作用。 本文以胶原和壳聚糖为主要原料,采用冷冻—冻干的方法,制备了孔径并孔间相互连通的多孔支架。以戊二醛为交联剂,进一步提高了支架的力学性能和酶解稳定性,同时保持了支架较高的吸水率。体外的成纤维细胞培养证明,胶原—壳聚糖真皮支架具有良好的细胞相容性及细胞活性。 在此基础上,引入了硅橡胶层,从而达到仿生模拟人体皮肤的结构与功能。硅橡胶层的引入,不但没有改变胶原—壳聚糖真皮支架的微观结构、酶解稳定性和细胞活性,而且进一步提高了支架的力学性能并降低了支架的透湿率。生物安全性评价也证明胶原—壳聚糖/硅橡胶双层皮肤支架无细胞毒性、对生物体无明显潜在致敏性和无明显皮肤刺激性。 最后通过猪脊背两侧皮肤移植实验,对胶原—壳聚糖/硅橡胶双层皮肤支架的原位诱导真皮再生性能进行了评价。探索了胶原—壳聚糖/硅橡胶双层皮肤支架移植的实验方法,建立了一套胶原基支架的移植方案,使成功率从零上升到94%。大体观察和组织学观察表明胶原—壳聚糖/硅橡胶双层皮肤支架可以有效原位诱导成纤维细胞的迁移、增殖及分化,促进受损组织真皮再生。但移植28后,仍然可以观察到大量的支架存在,说明支架在体内的降解吸收过程需要较长