背景聚酰胺胺树枝状大分子(PAMAM)是一类对口服药物有显著促进吸收作用的聚合物,但其结构上的胺基与细胞膜的相互作用,导致其具有细胞膜毒性,抑制了其进一步的应用,研究表明对PAMAM进行结构修饰可以改善其细胞毒性。第四代 PAMAM(G4.0-PAMAM)被不同分子量聚乙二醇(Polyethylene glycol 1000,2000,5000)(PEG1000,2000,5000)修饰,形成一系列 PAMAM-PEG 聚合物,胺基的减少及外层PEG作为保护层降低了细胞膜毒性,其生物安全性得到提升,可作为一种新型吸收促进剂进行研究。甘草苷属于黄酮类化合物,口服吸收时首过效应明显,易与肠道中的酶发生水解反应;吴茱萸碱属于生物碱类化合物,近似不溶于水,在体内可促进细胞凋亡,快速排泄与代谢且在局部器官会迅速积聚,产生副作用;酸枣仁皂苷A分子量较大,口服生物利用度差。三种化合物均属于课题组前期建立的长白山活性药物成分库,具有活性强但生物利用度低的特点,且前期课题组已研究PAMAM及低聚乙二醇(Oligoethylene Glycols)修饰的PAMAM聚合物PAMAM-OEG对三类化合物的促吸收作用。本课题以PAMAM-PEG聚合物作为研究对象,通过探索PAMAM-PEG的生物安全性及对吴茱萸碱、甘草苷、酸枣仁皂苷A的促吸收作用,既可观测不同分子量PEG对PAMAM的修饰作用,也可与本课题组前期研究成果进行比较。方法通过细胞MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)活性法和大鼠肠道总蛋白释放法测定PAMAM-PEG作用后的细胞存活率、LDH活性及肠道总蛋白释放含量变化,探究PAMAM-PEG的生物安全性;通过体外MDCK细胞转运实验和大鼠在体肠袢循环实验,测定PAMAM-PEG作用后吴茱萸碱、甘草苷和酸枣仁皂苷A的转运渗透量及血药浓度变化,考察PAMAM-PEG的促吸收作用。结果在 PAMAM-PEG5000、PAMAM-PEG2000、PAMAM-PEG 1000 的体外及在体生物安全性实验中,本研究发现三类聚合物的细胞毒性均具有浓度依赖性,相同浓度前提下,PAMAM-PEG2000表现出更佳的生物安全性,0.05%(w/v)的PAMAM-PEG2000无显著细胞毒性且更适宜进行后续实验。体外细胞转运实验结果表明,0.05%(w/v)的PAMAM-PEG2000、PAMAM-PEG1000、PAMAM-PEG5000可使吴茱萸碱的累积渗透量提高1.32倍、1.28倍、1.11倍;0.05%(w/v)的PAMAM-PEG2000、PAMAM-PEG 1000、PAMAM-PEG5000可使甘草苷的累积渗透量提高1.45倍、1.38 倍、1.26 倍;0.05%(w/v)的 PAMAM-PEG2000、PAMAM-PEG1000、PAMAM-PEG5000均对酸枣仁皂苷A的累积渗透量无显著提升作用。在体大鼠肠袢实验表明,0.1%(w/v)PAMAM-PEG2000对吴茱萸碱、甘草苷、酸枣仁皂苷A的药时曲线AUC值分别提高了 1.31倍、1.53倍和1.07倍。结论经PEG修饰后的PAMAM衍生物PAMAM-PEG2000具有良好的生物安全性,且对BCSⅣ类化合物吴茱萸碱和甘草苷药物具有较好的促吸收作用。对于低渗透性、低溶解性的化合物,PAMAM-PEG2000可作为一种潜在安全无毒的肠道吸收促进剂进行进一步研究。