目的：牙周膜成纤维细胞是牙周组织修复与重建的主体细胞之一，牙周膜成纤维细胞在体外培养时可显示出成骨或成牙骨质等矿化组织的能力和趋势，并具有高效合成及降解胶原及其他细胞外基质的能力，对多种生长因子、趋化因子的促分化、分裂作用有较高的反应性，从而被认为是研究牙周组织修复与重建的重要细胞。本实验通过原代培养，获得人牙周膜成纤维细胞，并探讨如何提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成功率。 方法：组织来源于12—15岁青少年因正畸而拨除的前磨牙，刮取牙根中1／3的牙周膜组织。采用组织贴壁培养法进行培养，采用冠根分离控制取材中的污染，首次传代前进行细胞分散的方法来提高传代的成功率，并对培养细胞的形态及超微结构进行了观察。结果：经免疫组化染色证实所培养的细胞为牙周膜成纤维细胞，通过冠根分离法可有效的控制组织污染，首次传代前进行细胞分散可提高细胞传代成功率，从而使细胞培养成功率提高。结论：获得原代培养的人牙周膜成纤维细胞，培养成功率在15～20％。