目的 检测乏氧诱导因子(HIF)-1α在胃癌组织、胃癌细胞株中的表达,探讨其对人胃癌细胞多药耐药性影响的机制.方法 Western blot检测胃癌组织、癌旁组织及胃癌细胞株中HIF-1 α表达;合成针对HIF-1α的siRNA,并转染胃癌细胞株OCUM-2MD3;噻唑蓝(MTT)比色法检测化疗药物对转染前后胃癌细胞的抑制率;荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测转染前后胃癌细胞多药耐药因子多药耐药性1(MDRl)、谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)、B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)、bax mRNA的表达变化;Western blot法检测P-糖蛋白(P-gp)、GST-π、bcl-2、bax蛋白表达变化.结果 HIF-1α在胃腺癌组织和细胞中的表达明显增高,mRNA表达为(0.853 ±0.182,0.497±0.088),蛋白表达为(0.952±0.198,0.325±0.052),且随分化程度的降低而显著升高(P＜0.01);HIF-1 α-siRNA转染OCUM-2MD3细胞后,HIF-1 α表达明显受到抑制,且抑制效果在剂量浓度为80 nmol/L,作用时间为24h最为明显,mRNA表达由(0.747±0.087)下降至(0.177±0.043),蛋白表达由(0.622±0.089)下降至(0.211±0.032) (P ＜0.05);HIF-1 α-siRNA转染OCUM-2MD3经48 h后各化疗药物对肿瘤细胞的抑制作用均明显增强(P＜0.05);转染后OCUM-2MD3中MDR1、GST-π、bcl-2 mRNA强度(0.44±0.06、0.46±0.07、0.37±0.08)均较对照组(0.90±0.11、1.04±0.10、1.01±0.19)明显降低(P＜0.05),而bax mRNA强度于转染后(1.91±0.09)较转染前(0.91±0.08)明显升高(P＜0.05);P-gp、GST-π、bcl-2蛋白水平(1.58±0.19、1.37±0.17、1.97±0.22)均较对照组(0.82±0.12、0.51±0.06、0.81±0.09)明显降低(P＜0.05),而bax蛋白水平于转染后(1.03±0.01)较转染前(0.51±0.07)明显升高(P＜0.05).结论 HIF-1α与胃癌MDR关系密切,抑制HIF-1α表达有明显的逆转胃癌细胞MDR的作用,该作用是通过调节多药耐药因子的表达而实现的。
乏氧诱导因子-1α对胃癌细胞多药耐药性的影响及机制
【摘 要】
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目的 检测乏氧诱导因子(HIF)-1α在胃癌组织、胃癌细胞株中的表达,探讨其对人胃癌细胞多药耐药性影响的机制.方法 Western blot检测胃癌组织、癌旁组织及胃癌细胞株中HIF-1 α表达;合成针对HIF-1α的siRNA,并转染胃癌细胞株OCUM-2MD3;噻唑蓝(MTT)比色法检测化疗药物对转染前后胃癌细胞的抑制率;荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测转染前后胃癌细胞多药耐药因子多药耐
【机 构】
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050011石家庄,河北医科大学第四医院外三科,050011石家庄,河北医科大学第四医院外三科,050011石家庄,河北医科大学第四医院外三科,050011石家庄,河北医科大学第四医院外三科,0500
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2012年29期
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