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目的:观察雄黄微生物提取液诱导K562ADM细胞凋亡的作用,探讨其作用机制。
方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、AnnexinV-PI双染法染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(FCM)观察雄黄微生物提取液诱导K562/ADM细胞的凋亡作用,采用FCM测定细胞Fas、Bel-2、Caspase3蛋白的活性变化,并以H3AsO3(As2O3在该溶液中的主要存在形式)作为阳性对照。
结果:雄黄微生物提取液可抑制K562/ADM细胞增殖;细胞形态呈典型凋亡形态改变;DNA电泳可见梯状条带出现;FCM分析显示:G1期细胞比例增高,G2-M和S期阻滞,Fas蛋白表达明显上调;Bcl-2蛋白表达显著下调,Caspase-3活性明显增强。
结论:雄黄微生物提取液可通过Fas/Bcl-2途径,激活Caspase-3而诱导K562/ADM细胞凋亡。