α-半乳糖苷酶基因Mel1在毕赤酵母中的组成型表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Wang_Sheng

【摘要】

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用PCR方法从酵母（Saccharomyces cerevisiae）AH109中扩增出α-半乳糖苷酶的Mell基因,将其克隆至整合型载体pGAPZαA中构建成组成型分泌表达酶产物的重组质粒pGAPZα-Mell.将线

【作者】

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张学文唐香山张金谌章怀云

【机构】

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湖南农业大学生物科学技术学院,中南林业科技大学生命科学与技术学院

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

：

Α-半乳糖苷酶 Mell基因重组质粒pGAPZα-Mell 组成型表达 α-galactosidase Mell gene recombinant plasm

【基金项目】

：

湖南省中青年基金项目（No.01JZY2099）资助.

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用PCR方法从酵母（Saccharomyces cerevisiae）AH109中扩增出α-半乳糖苷酶的Mell基因,将其克隆至整合型载体pGAPZαA中构建成组成型分泌表达酶产物的重组质粒pGAPZα-Mell.将线性化的重组质粒pGAPZα-Mell电击转化至毕赤酵母（Pichia pastoris）KM71,在含有100 mg/mL zeocin和预先涂布有X-α-gal的YPDS平板上选择蓝色阳性菌落.发酵培养酵母的上清经SDS-PAGE分析,在53 kD处有特异带;经非变性PAGE凝胶电泳,与显

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