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制备凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白,并鉴定其生物学活性。利用PCR技术构建tTF与链霉亲和素SA的融合基因,克隆至表达裁体pET22b(+),在E.coli BL21(DE3)中表达,镍亲和层析柱纯化tTF/SA融合蛋白。凝血实验和FX活化实验鉴定融合蛋白中tTF的活性,ELISA鉴定融合蛋白中SA与生物素Biotin结合的活性。获得序列正确的tTF/SA/pET22b(+)重组子,融合基因在E.coli BL21(DE3)中高效表达。纯化后的融合蛋白具有活化FX、引起血液凝固的能力,且能与生物