目的了解2009年引起河北省手足口病的病原谱及分布特征,为制定预防控制措施提供实验依据。方法通过流行病学调查,采集手足口病临床诊断病例的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液标本,针对肠道病毒(EV)5′端非编码区保守基因序列以及EVVP1至2A区基因序列设计EV通用引物和型特异性引物,通过RT-PCR扩增检测HFMD临床诊断病例的标本,并对病原进行分型。结果采用RT-PCR法共检测HFMD临床诊断病例1990份标本,1296份标本EV阳性,阳性率为65.13%,其中752份标本EV71阳性,452份CA16阳性,1份EV71+CA16阳性,91份其他EV阳性。随机抽取55份其他EV阳性标本经RT-PCR和测序进一步分型,除24份未定型外,共鉴定出31份,其中CA10占18.18%(10/55),CA6占14.55%(8/55),ECO30占9.09%(5/55),ECO6、ECO9各占3.64%(2/55),CA5、CA14、CB5、ECO14各占1.82%(1/55),未定型占43.64%(24/55)。结论 2009年引起河北省手足口病流行的病原体主要为EV71和CA16,同时还有部分CA5、CA6、CA10、CA14、CB5、ECO6、ECO9、ECO14、ECO30等其他型别,引起河北省重症病例的EV主要型别为EV71。