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以枯草芽孢杆菌168(B.subtilis168)染色体为模板PCR扩增出P43启动子,与大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pUBC19相连得到表达载体pUBC-P43,然后将枯草芽孢杆菌脂肪酶基因lipA克隆到载体pUBC-P43启动子下游,得到重组质粒pUBCPL并转化B.subtilisTZ10。经中性红油脂平板、酶切和PCR方法鉴定得到重组菌TZ10/pUBCPL。宿主菌TZ10是B.subtilis DB104染色体缺失了lipA基因后获得。重组菌经初步发酵,以橄榄油为底物测定发酵上清液最高脂肪酶活力为