安宫牛黄丸药用价值分析

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  [摘 要]安宫牛黄丸可降低脓毒症大鼠的死亡率,并对肺、肝等重要器官有一定的保护作用。
  [关键词]安宫牛黄丸 药用
  中图分类号:S567 文献标识码:A 文章编号:1009-914X(2013)12-0239-01
  脓毒症(sepsis)是严重创(烧)伤、休克、外科大手术后常见的并发症,其本质上是一个失控的全身自我破坏性炎症反应过程。脓毒症属于中医温热病范畴,是由于火毒炽盛、正气亏虚,正不胜邪、邪毒内陷,客入营血所致。安宫牛黄丸是中医治疗温热病的“三宝”之一,也是中医危重病症急救要药。本文观察了安宫牛黄丸对盲肠结扎穿孔(CLP)法复制脓毒症模型大鼠重要器官功能及死亡率的影响,现报道如下。
  一、设备与材料的选用
  1、主要药物、试剂与仪器安宫牛黄丸由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产(批号:5010279),水合氯醛由国药集团化学试剂有限公司生产(批号:20071210),髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性检测试剂盒由南京建成科技有限公司提供(批号:071103),AU5421全自动生化检测仪由日本Olympus公司生产。
  2、动物模型制备清洁级SD大鼠90只,雌雄各半,体质量180~220g,购自广东省医学实验动物中心,合格证号:0031637。在Wichterman方法的基础上进行改良,复制腹腔感染型脓毒血症。术前禁食12h,用100mg/L水合氯醛按15mL/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠,常规消毒腹部,在下腹部正中央切口,长约2cm,打开腹腔寻找盲肠与小肠及大肠交界处,用灭菌4号丝线环形结扎,结扎完毕后仔细检查,保持肠道通路正常。在与肠系膜相对的盲端肠壁浆膜面用9号针头穿刺2次,2个针孔相距约3mm,第1针孔距盲端约3mm,同时在第2针孔处放置1条宽2mm的橡胶引流片,防止伤口愈合,轻轻将肠管放回原处,关闭腹腔,逐层缝合。术后即刻皮下注射生理盐水,补充手术过程中体液的丢失,剂量10mL/kg。
  3、动物分组及给药将90只大鼠随机分为正常对照组(10只)、模型组(20只)和中药低、中、高剂量组(各20只)。取中药临床剂量的10、20、30倍分别作为低、中、高剂量。中药低、中、高剂量组分别于术前05h和术后6h按10、20、30g·kg-1·d-1剂量灌胃安宫牛黄丸。正常对照组和模型组动物灌胃饮用水。观察记录24h动物死亡率,24h后各组动物活杀,检测血清及肺组织有关指标的变化。
  4、标本的采集和处理无菌状态下腹主动脉采血,用肝素钠抗凝,3000r/min离心15min,取血浆于-20℃保存。无菌状态下取肺组织200mg,加入18mL生理盐水在冰浴下匀浆,3000r/min离心15min,取上清液。
  5、指标检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)、肌酐(Cr)含量采用全自动生化分析仪测定,肺组织MPO活性检测采用酶学分光光度法。
  6、统计学方法采用SPSS 130统计软件包,对计量资料进行t检验和方差分析,计数资料进行χ2检验。
  二、实验分析
  1、安宫牛黄丸对脓毒症大鼠死亡率的影响与正常对照组比较,模型组死亡率显著增高(P<001)。中药低、中剂量组死亡率与模型组比较显著降低(P<005),中药高剂量组死亡率虽然低于模型组,但差异无显著性意义(P>005)。
  2、安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤的影响大鼠经CLP手术造模后,出现活动减少、反应迟钝、嗜睡、竖毛、进食减少、不饮水、腹泻及部分出现呼吸急促等现象,与临床所见的脓毒症表现比较相似。
  CLP术后24h模型组大鼠血清ALT、TB水平显著高于正常对照组(P<005),表明脓毒症大鼠肝脏有一定的损伤。中药干预后24h各剂量组大鼠的ALT水平无显著改善(P>005)。中药低量剂组能显著降低脓毒症大鼠的血清TB水平(P<005),而中、高剂量组对脓毒症大鼠血清TB有降低的趋势,但与模型组比较差异无显著性意义(P>005)。
  模型组大鼠血清Cr水平无显著变化(P>005),说明CLP大鼠造模24h肾脏功能尚无显著的损害。中药各剂量组干预后大鼠血清Cr水平也未出现显著改变(P>005)。
  模型组大鼠肺组织中MPO活性显著升高(P<005),表明CLP脓毒症大鼠肺组织炎症损伤明显。中药低、中、高剂量组干预可以显著降低肺组织MPO活性(P<005或P<001),减轻脓毒症对肺组织的炎症损伤。结果见表2。表1各组脓毒症大鼠24h死亡率比较表2各组脓毒症大鼠重要器官损伤比较
  三、小结
  脓毒症是多种疾病在发生发展过程中所表现出来的一种共同的病理生理过程。主要由感染性因素引起,如革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌、病毒等致病微生物入侵所致。这些感染因素迅速激活机体非特异免疫系统释放大量早期和晚期炎症介质,诱发失控性炎症反应(SIRS),进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征(MODS)甚至死亡。近20年来,尽管人们采取了许多抗炎方法干预脓毒症的病理过程,但是临床疗效并不理想。
  安宫牛黄丸出自我国清代著名温病学家吴鞠通著作《温病条辨》,该方由牛黄、犀角、黄连、黄芩、栀子、郁金、麝香、珍珠、朱砂、雄黄、冰片等11味中药组成,具有清热解毒、芳香辟秽、开窍通闭之功效,对温热病有独特的疗效。临床应用安宫牛黄丸及其类方治疗脓毒症取得较好疗效[8-9]。本实验结果显示,模型组大鼠表现出与临床脓毒症者相似的症状,大鼠肝、肺等器官损伤明显,死亡率高达55%。安宫牛黄丸低、中剂量组能显著降低脓毒症大鼠的死亡率,验证了安宮牛黄丸对脓毒症的治疗作用。
  胆红素代谢和肝脏关系密切,肝细胞对胆红素的摄取、结合、排泄过程发生障碍可致血清总胆红素升高。脓毒症大鼠血清总胆红素升高,在一定程度上反映了脓毒症对大鼠肝脏的损伤,安宫牛黄丸低剂量组能显著降低脓毒症大鼠的血清总胆红素水平(P<005),提示安宫牛黄丸对脓毒症大鼠的肝脏功能具有一定的保护作用。
  MPO是中性粒细胞(PMN)特有的还原酶,主要存在于PMN的嗜天青颗粒中,且每个细胞所含酶的量是恒定的,约占细胞干质量5%,故可以通过组织MPO活性定量测定PMN的数目,肺组织中MPO活性高低可定量反映PMN扣押与聚集的程度[10-11]。实验性脓毒症大鼠肺组织中的PMN浸润,应与肺脏特殊的解剖学和生理学特点有关。因为肺脏不仅是一个重要的代谢器官,同时又是全身静脉血液的过滤器官,各组织脏器所产生并释放到血液中的代谢产物、活性物质都要从肺脏经过,且肺脏毛细血管分支较少,血管长,灌注压低,血流缓慢,流经肺毛细血管活化的PMN易与内皮细胞接触并粘附,且粘附后不易被缓慢的血流冲走,因此PMN易聚集于肺脏。而肺组织活化的中性粒细胞经脱颗粒作用,释放弹性蛋白酶、MPO和金属酶等多种蛋白酶,分解胞外纤维与基质,可导致肺组织损伤[12]。因此MPO活性的高低在一定程度上可以反映肺组织的损伤程度。本实验结果显示,CLP术后24h大鼠肺组织中MPO活性显著升高,安宫牛黄丸低、中、高剂量组可以显著降低肺组织MPO的活性,减轻脓毒症对肺组织的损伤,提示安宫牛黄丸对脓毒症大鼠的肺脏具有一定的保护作用。
  综上所述,安宫牛黄丸可不同程度地降低脓毒症大鼠的死亡率,并对肺、肝等重要器官功能具有一定的保护作用。
  参考文献
  [1]张丹,黄萍,李俊,胡质毅,王艳丽,安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响[J]论文网.
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