论文部分内容阅读
目的 应用真核表达系统表达人重组蛋日酶３（ＰＲ３），并用于检测患者血清中的抗蛋日酶３抗体（ａｎｔｉ－ＰＲ３）。方法 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ ）技术获得蛋白酶３的ｃＤＮＡ．并克隆至真核表达载体ｐｃＤＩ。将其瞬时转染至ＣＯＳ－７细胞，应用夹心ＥＬＩＳＡ法检测细胞上清中重组蛋白酶３（ｒＰＲ３）的表达，并以表达上清作为抗原检测患者血清中的ａｎｔｉ－ＰＲ３。同时转染ＣＨ０细胞，建立ＣＨ０／ＰＲ３稳定表达株。 结果 转染后的ＣＯＳ－７细胞和ＣＨＯ细胞均可以表达ｒＰＲ３，且ＣＯＳ－７细胞表达的ｒＰＲ３可以被多数ａｎｔｉ－ＰＲ３阳性患者血清识别。结论 用真核细胞表达的ｒＰＲ３具有抗原活性，为重组ＰＲ３替代天然ＰＲ３用于临床检测和实验研究提供了新的途径。