【摘 要】
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为检测犬布氏杆菌(Brucella canis)重组Cu/Zn-SOD蛋白的抗原性,本研究通过PCR方法扩增B.canis的Cu/Zn-SOD基因,将其克隆于表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-SOD。将
【机 构】
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华南农业大学兽医学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨维科生物技术开发公司;
【基金项目】
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广东省科技计划项目(2008A060202017、2009B060300024)
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为检测犬布氏杆菌(Brucella canis)重组Cu/Zn-SOD蛋白的抗原性,本研究通过PCR方法扩增B.canis的Cu/Zn-SOD基因,将其克隆于表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-SOD。将该质粒转化受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳分析,表达的重组蛋白约20 ku,以可溶性形式存在。经western blot分析表明,表达的重组蛋白可以与B.canis阳性血清发生特异性反应。表达的重组蛋白经纯化后,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,western blot分析表明制备的多克隆抗体可以与重组Cu/Zn-SOD蛋白发生特异性反应,表明Cu/Zn-SOD蛋白具有良好的抗原性。
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