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  5. 金黄色葡萄球菌新型耐热核酸酶(Nuc2)的定点突变与特性分析

金黄色葡萄球菌新型耐热核酸酶(Nuc2)的定点突变与特性分析

来源 :食品工业科技 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhshp123456
【摘 要】
：
本研究选取了F60、A62、T102和Y135这4个可能的关键位点,采用定点突变的方法成功构建了5个Nuc2的单点和多点突变体。体外表达并纯化这些核酸酶,对其活性、耐热性和二级结构进
【作 者】
：
陈丽敏  施春雷  王大鹏  张道锋  史贤明 
【机 构】
：
上海交通大学农业与生物学院中美食品安全联合研究中心微生物代谢国家重点实验室
【出 处】
：
食品工业科技
【发表日期】
：
2015年17期
【关键词】
：
金黄色葡萄球菌 新型耐热核酸酶 定点突变 二级结构 
【基金项目】
：
国家863项目(2012AA101601);教育部博士点基金(20120073110052
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本研究选取了F60、A62、T102和Y135这4个可能的关键位点,采用定点突变的方法成功构建了5个Nuc2的单点和多点突变体。体外表达并纯化这些核酸酶,对其活性、耐热性和二级结构进行测定。结果表明：经方差分析（p〈0.05）,T102M和F60A/A62L/T102M/Y135V的核酸酶活性与野生型相比较显著下降,并且F60A/A62L/T102M/Y135V的酶活性基本丧失;T102M和F60A/A62L的耐热性明显弱于野生型;T102M和F60V/A62L的二级结构中α-螺旋结构的含量明显低于野生型
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