不同蛋白酶海参酶解液的制备及其体外免疫调节活性

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以海参体壁为原料,采用5种商业用酶(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶)对其进行酶解,测定酶解液的水解度和分子量分布,并重点分析分子量小于3 kDa超滤组分的氨基酸组成、结构特性及其对巨噬细胞的免疫调节活性。结果表明:中性蛋白酶对海参体壁的水解能力最高,反应300 min水解度达17.18%;中性蛋白酶酶解液中小于3 k Da超滤组分(SCH-N-I)占96.33%,必需氨基酸高达89.52 mg/g,高于其余4种蛋白酶酶解液。紫外光谱和荧光光谱结果显示,中性蛋白酶酶解液超滤组分SCH-N-I较其它酶解液超滤组分具有较高的表面疏水性、紫外吸光度和内源荧光强度,且最大紫外吸收波长和最大荧光峰向高波长方向偏移,表明其可能具有更高的免疫生物活性。RAW264.7巨噬细胞免疫活性实验结果显示,当SCH-N-I浓度为200μg/mL时,巨噬细胞表现出良好的存活率[(121.79±4.98)%]及较高的吞噬力(0.107 7±0.001 0)和NO释放量[(15.39±0.33)μmol/L];SCH-N-I的免疫活性高于其他4种蛋白酶酶解液超滤组分。
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