【摘 要】
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目的：本研究旨在观察健脾活骨方（JPHGF）对实验性酒精性股骨头坏死（AONFH）血管损伤的修复作用，并基于血管内皮细胞生长因子（VEGF）/血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路探索其作用机制。方法：实验采用46% vol红星二锅头10 mL·（kg·d）-1灌胃建立AONFH大鼠模型，观察JPHGF不同剂量组(5.8、11.6、
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目（82030122）;国家自然科学基金面上项目（81973888）； 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（ZXKT20013）； 中国中医科学院科技创新工程项目（C12021A03808）；
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目的：本研究旨在观察健脾活骨方（JPHGF）对实验性酒精性股骨头坏死（AONFH）血管损伤的修复作用，并基于血管内皮细胞生长因子（VEGF）/血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路探索其作用机制。方法：实验采用46% vol红星二锅头10 mL·（kg·d）-1灌胃建立AONFH大鼠模型，观察JPHGF不同剂量组(5.8、11.6、23.3 g·kg-1)的干预作用，选择健骨生丸(JGS，1.53 g· kg-1)为阳性对照；给药8周后，Micro-CT扫描分析股骨头骨计量学，墨汁灌注观察股骨头骨髓内微血管面积，苏木素-伊红（HE）染色法观察病理学改变程度，免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot）法检测股骨头中血小板-内皮细胞粘附分子（CD31）、VEGF、VEGFR2、PI3K、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）和抑癌基因（PTEN）的蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠股骨头骨小梁断裂变细，空骨陷窝增多，脂肪细胞数量明显增多和直径明显变大（P＜0.001），Micro-CT影像学结果显示BMD（骨密度）、BV/TV（骨体积分数）、Tb.Th（骨小梁厚度）、Tb.N（骨小梁数量）均明显降低（P＜0.05，P＜0.01或P＜0.001），BS/BV（骨表面积体积比）和Tb.Sp（骨小梁分离度）均明显升高（P＜0.01，P＜0.001），墨汁灌注结果表明股骨头髓腔内微血管面积明显减少（P＜0.001）；与模型组比较，JPHGF作用后能降低AONFH大鼠股骨头的空骨陷窝率、脂肪细胞面积和直径，Micro-CT影像学结果显示JPHGF低剂量组BV/TV、Tb.Th、Tb.N均明显升高（P＜0.05，P＜0.01），BS/BV明显降低（P＜0.01），BMD呈升高趋势，Tb.Sp呈下降趋势，但均无统计学差异，JPHGF中和高剂量组的BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均明显升高（P＜0.05，P＜0.001），BS/BV、Tb.Sp明显降低（P＜0.05，P＜0.001），并明显升高股骨头髓腔内微血管面积（P＜0.05，P＜0.01或P＜0.001），扩大股骨头髓腔内微血管面积；模型组大鼠较正常组均明显下调CD31、VEGF、VEGFR2、PI3K、p-Akt和PTEN的表达含量（P＜0.001），JPHGF作用后中、高剂量组明显升高大鼠股骨头CD31、PI3K、p-Akt表达含量（P＜0.01，P＜0.001），降低PTEN蛋白的表达水平（P＜0.01，P＜0.001），同时JPHGF作用后上调中VEGF、VEGFR2表达含量（P＜0.05，P＜0.01或P＜0.001）。结论：JPHGF对AONFH股骨头血管损伤具有修复作用，其机制可能与激活VEGF/VEGFR2/PI3K/Akt信号通路有关，相关研究结果将为JPHGF的临床应用提供一定科学依据和参考。
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