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摘 要:检测方向的不确定性是理化药毒物检验的一大特点,针对不挥发性药毒物,本文在提取方法广谱,低选择性方面进行了尝试。
关键词:不挥发性药毒物提取;广谱
1 引言
本文提出一种针对血、尿中不挥发性药毒物的高效提取方法。通常的提取方法需事先确定提取目标,然后根据所确定目标物质的酸碱性、极性等理化性质,调节适宜的酸碱性等条件,再进行提取、净化。理化药毒物检验中遇到的检材存在数量少及检验方向不确定等特点,这也是我们实际工作中遇到的难题,一旦方法选择不合适,就可能存在漏检的问题。而本文中方法仅需要确定提取目标为游离在血、尿中不挥发性药毒物即可,所需检材量少,方法的选择性较低,可以更加有效地提取目标物,更好地服务实战。
2 实验操作:
2.1 取血或尿4ml,离心后,取上清液置入洁净离心管中,用氮气吹缩至0.5ml左右。
2.2 向0.5ml的氮吹浓缩液中加入明矾1小粒,涡旋振荡5分鐘,离心5分钟。取上清液置入洁净离心管中。
2.3 上清液用氮气吹干,加入0.5ml无水乙醇,涡旋振荡5分钟,离心5分钟,取上清液置入洁净离心管中,氮气吹干。
2.4 最后加入0.1ml乙酸乙酯定容,离心后取上清液供检。
3讨论:
3.1提取过程中的净化操作。实验2.2中用明矾以絮状沉淀方式沉淀经浓缩的血、尿中存在的大部分杂质,避免乙醇溶解提取杂质中的有关成分。实验2.3和2.4分别用无水乙醇、乙酸乙酯溶解氮吹残渣,通过两种不同极性、溶解性溶剂的转换,可有效降低杂质的存在。经上述净化步骤,乙酸乙酯定容液中含有的杂质相对减少很多,使用气质联用仪检验已可以分离,干扰杂质有效地降低,对检验结果影响不大。如在实验过程中使用高速冷冻离心机,冷冻后离心实验2.3中的无水乙醇溶解液和实验2.4中乙酸乙酯定容液,净化效果更好。
3.2提取效率问题。本方法可以不考虑不挥发性药毒物在水相和有机相间的分配比问题。无水乙醇、乙酸乙酯都是溶解不挥发性药毒物的良好试剂。目前,主要使用气质联用仪或液质联用仪进行定性分析,检验的灵敏度可达ppm级。意味着即使某些药毒物在无水乙醇或乙酸乙酯中的溶解性不好,但ppm级的溶解还是可以保证的,而血、尿中的不挥发性药毒物浓度以ppm级为主。实验操作中,涡旋振荡操作可以提高无水乙醇、乙酸乙酯对氮吹残渣中的药毒物溶解速度、溶解率;氮吹浓缩时,氮气流不宜过大,防液体溅出或喷溅到离心管上半截管壁上,影响提取率。
3.3药毒物与蛋白质结合问题。如考虑到血、尿中药毒物与蛋白质结合问题,可先进行水解操作,后依照本文方法实验,同样可以取得良好的提取效果。
检测方向的不确定性是理化药毒物检验的一大特点,针对不挥发性药毒物,本文提取方法做到了广谱,低选择性。历年的工作实践中,笔者依照文中方法,在血或尿中分别检验出毒鼠强、吗啡、氧六单乙酰吗啡、安定、舒乐安定、利眠宁等成分,取得很好的实验效果。
关键词:不挥发性药毒物提取;广谱
1 引言
本文提出一种针对血、尿中不挥发性药毒物的高效提取方法。通常的提取方法需事先确定提取目标,然后根据所确定目标物质的酸碱性、极性等理化性质,调节适宜的酸碱性等条件,再进行提取、净化。理化药毒物检验中遇到的检材存在数量少及检验方向不确定等特点,这也是我们实际工作中遇到的难题,一旦方法选择不合适,就可能存在漏检的问题。而本文中方法仅需要确定提取目标为游离在血、尿中不挥发性药毒物即可,所需检材量少,方法的选择性较低,可以更加有效地提取目标物,更好地服务实战。
2 实验操作:
2.1 取血或尿4ml,离心后,取上清液置入洁净离心管中,用氮气吹缩至0.5ml左右。
2.2 向0.5ml的氮吹浓缩液中加入明矾1小粒,涡旋振荡5分鐘,离心5分钟。取上清液置入洁净离心管中。
2.3 上清液用氮气吹干,加入0.5ml无水乙醇,涡旋振荡5分钟,离心5分钟,取上清液置入洁净离心管中,氮气吹干。
2.4 最后加入0.1ml乙酸乙酯定容,离心后取上清液供检。
3讨论:
3.1提取过程中的净化操作。实验2.2中用明矾以絮状沉淀方式沉淀经浓缩的血、尿中存在的大部分杂质,避免乙醇溶解提取杂质中的有关成分。实验2.3和2.4分别用无水乙醇、乙酸乙酯溶解氮吹残渣,通过两种不同极性、溶解性溶剂的转换,可有效降低杂质的存在。经上述净化步骤,乙酸乙酯定容液中含有的杂质相对减少很多,使用气质联用仪检验已可以分离,干扰杂质有效地降低,对检验结果影响不大。如在实验过程中使用高速冷冻离心机,冷冻后离心实验2.3中的无水乙醇溶解液和实验2.4中乙酸乙酯定容液,净化效果更好。
3.2提取效率问题。本方法可以不考虑不挥发性药毒物在水相和有机相间的分配比问题。无水乙醇、乙酸乙酯都是溶解不挥发性药毒物的良好试剂。目前,主要使用气质联用仪或液质联用仪进行定性分析,检验的灵敏度可达ppm级。意味着即使某些药毒物在无水乙醇或乙酸乙酯中的溶解性不好,但ppm级的溶解还是可以保证的,而血、尿中的不挥发性药毒物浓度以ppm级为主。实验操作中,涡旋振荡操作可以提高无水乙醇、乙酸乙酯对氮吹残渣中的药毒物溶解速度、溶解率;氮吹浓缩时,氮气流不宜过大,防液体溅出或喷溅到离心管上半截管壁上,影响提取率。
3.3药毒物与蛋白质结合问题。如考虑到血、尿中药毒物与蛋白质结合问题,可先进行水解操作,后依照本文方法实验,同样可以取得良好的提取效果。
检测方向的不确定性是理化药毒物检验的一大特点,针对不挥发性药毒物,本文提取方法做到了广谱,低选择性。历年的工作实践中,笔者依照文中方法,在血或尿中分别检验出毒鼠强、吗啡、氧六单乙酰吗啡、安定、舒乐安定、利眠宁等成分,取得很好的实验效果。