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单一氨基酸的置换可以改变酶的热稳定性。脯氨酸（Ｐｒｏ）残基在蛋白质结构及其热稳定性中具有特殊作用。它十分偏爱β－转折或无规卷曲结构，而很少出现在α－螺旋和β－折叠中。分析认为在改善酶热稳定性的蛋白质工程中，只要主链构象不发生骤变，则可在适当的β－转折或无规卷曲中引入Ｐｒｏ，通过其刚性的吡咯烷环，降低蛋白质去折叠时的骨架熵，从面使其周围的构象更合理。这一Ｐｒｏ理论（ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｎｅ ｔｈｅｏｒ