【摘 要】
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目的:探讨尿激酶原糖基化对其表达稳定性的影响。方法:构建非糖基化尿激酶原,收取无血清培养上清为检测标本。用嗜热杆菌金属蛋白酶(thermolysin)激活尿激酶原。用抑肽酶(aprotinin
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目的:探讨尿激酶原糖基化对其表达稳定性的影响。方法:构建非糖基化尿激酶原,收取无血清培养上清为检测标本。用嗜热杆菌金属蛋白酶(thermolysin)激活尿激酶原。用抑肽酶(aprotinin)终止激活反应。生色底物S-2444用于显色反应。在405nm波长处测定分光光度值(OD值)以确定双链成分的比例。在不用thermolysin激活的条件下,用公式计算单链尿激酶原比例。将重组尿激酶原和天然尿激酶原的培养上清置于4℃和37℃。每隔12h测定总活性和单链成分比例。经过阳离子层析和凝胶层析纯化后,测定蛋白产
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