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【摘要】目的：评价UF-50与相差显微镜在血尿来源鉴别中的价值。方法 选取肾内科门诊病例95例和住院病例86例，分别用UF-50与相差显微镜检查分析尿液中红细胞的信息。结果 对于门诊来源病例和住院来源病例，UF-50检查的敏感性(100%和96.5%)高于相差显微镜(87.9%和85.5%)，P<0.05；而相差显微镜的特异性(72.6%和91.7%)高于UF-50(51.6%和58.3%)，P<0.05。结论 UF-50与相差显微镜结合使用是血尿来源鉴别的最好策略。
【关键词】血尿；UF-50；相差显微镜；尿液；红细胞
The phase contrast microscope and the UF 150 urines slime analyzer originates in the distinction at the hematuria the comparison
WANG Xian-he
【Abstract】goal：Appraises UF-50 and the phase contrast microscope originates in the distinction at the hematuria the value. The method selection kidney internal medicine department outpatient service case of illness 95 examples and are hospitalized the case of illness 86 examples，separately uses UF-50 and in the phase contrast microscope inspection analysis urine the red blood cell information. The result and is hospitalized origin case of illness regarding the outpatient service origin case of illness，the UF-50 inspection sensitivity (100% and 96.5%) is higher than the phase contrast microscope (87.9% and 85.5%)，P<0.05But the phase contrast microscope specificity (72.6% and 91.7%) is higher than UF-50 (51.6% and 58.3%)，P<0.05Conclusion UF-50 and the phase contrast microscope union use is the hematuria originates the distinction the best strategy.
【Key word】hematuria；UF-50；Phase contrast microscope；Urine；Red blood cell
目前，在临床上较为经典的鉴别血尿来源的方法一般以相差显微镜检查尿液红细胞形态作为鉴别指标。近年来全自动尿沉渣分析仪的应用大幅提高了尿沉渣计数的准确度、精密度，节省了劳动力，并提供了尿液中红细胞的相应参数，也可以用作评估血尿来源。因此随着新的尿沉渣分析方法的出现，迫切需要对所有的有关血尿来源检查诊断策略进行评估分析；同时由于病人医疗费用的限制、临床医生对实验室检查结果报告时间和准确度的要求等都需要我们研究此类问题。本文收集二组血尿患者分别进行UF-50全自动尿液沉渣分析和相差显微镜检查红细胞形态，评价UF-50与相差显微镜的分析效能，为常规临床实验室的鉴别血尿来源诊断策略提供参考。
1 材料与方法
1.1 病例资料
1.1.1 肾病门诊病人95例。本组病人均为2007年1-12月本院肾内科门诊病人，其中男37例，女58例，年龄28-85岁，平均(51.2士22.4)岁。经详细病史、临床症状怀疑为肾小球肾炎或肾盂肾炎或膀胱炎等疾病，尿液干化学检查隐血试验阳性，用UF-50尿液沉渣分析和相差显微镜检查。对于初步诊断为肾炎者行肾活检确诊，计33例；非肾小球疾病者用造影(膀胱镜或B超)确诊，计62例。
1.1.2 肾内科住院病人86例。本组病人均为2007年1-12月本院住院病人，其中男35例，女51例，年龄17-68岁，平均(36.2士18.9)岁。其中62例经详细病史、临床化学与免疫学检查、肾活检证实为肾小球疾病包括IgA肾病(12例) 系膜增殖性肾小球肾炎(36例)、膜性肾小球肾炎(6例)、微小病灶性肾小球肾炎(6例)；24例用造影(膀胱镜或B超)确诊为非肾小球病变包括膀胱炎(12例)、肾结石8例、尿路感染6例。
1.2 仪器与试剂。UF-50尿液沉渣分析仪及其配套试剂(SYS-MEX)，相差显微镜(OLYMPUS)，Mejer-600干化学尿液分析仪。
1.3 方法
1.3.1 UF-50尿液沉渣分析仪检查取尿液10ml(住院病人取新鲜中段晨尿，门诊病人取新鲜中段随机尿)于专用测定管内。仪器在测定前使用专用质控液检测仪器状态，尿液标本在收集2小时内测试完毕。参考nyodo提供的参考标准，80%红细胞前向散射强度(FSC)84ch为均一性红细胞，即为非肾小球性血尿；红细胞前向散射强度(FSC)126ch且<80%红细胞>84ch为非均一性红细胞，即为肾小球性血尿；红细胞前向散射强度介于二者之间称为混和性红细胞。
表1 86例住院肾病病人UF-50与相差显微镜测定结果
表2 95例门诊肾病病人UF-50 与相差显微镜测定结果
表3 门诊病人UF-50与相差显微镜测定结果比较
1.3.2 相差显微镜检查。上述标本做UF-50尿液沉渣检查时，取10mL离心1500RPM，5min，弃去上清液，留0.5ml混匀直接涂片：1O个视野，50个红细胞，观察红细胞的形态。尿液标本在收集2小时内测试完毕。多形红细胞>70%或多形红细胞<70%但棘形红细胞>5%，即为肾小球性血尿；多形红细胞<20%为基本正常，即为非肾小球性血尿；介于二者之间为混和性血尿。
1.3.3 统计分析。UF-50尿液沉渣分析仪与相差显微镜检查这二种方法之间敏感性与特异性的比较采用卡方检验。P<0.05表示差异有统计学意义。所有数据的录入及统计分析均采用统计软件SPSS11.0进行。
2 结果
2.1 以UF-50检测尿液为非均一性为肾小球病变的诊断依据，住院病人组的敏感性为96.8%，特异性为58.3%；门诊病人组的敏感性为100%，特异性为51.6%。用卡方检验比较UF-50在门诊与住院病人之间敏感性的差异无统计学意义，但是特异性的差异有统计学意义，P<0.05。
2.2 以相差显微镜检测尿液为多形性为肾小球病变的诊断依据，住院病人组的敏感性为85.5%，特异性为91.7%；门诊病人组的敏感性为87.9%，特异性为72.6%。用卡方检验比较相差显微镜在门诊与住院病人之间敏感性的差异无统计学意义，但是特异性的差异有统计学意义，P<0.05。
2.3 对于门诊病人组，UF-50检查的敏感性(99.9%)高于相差显微镜的敏感性(87.9%)；UF-50检查的特异性(50.6%)低于相差显微镜的特异性(71.6%)。
表4 门诊病人UF-50与相差显微镜测定结果比较
P﹤0.01
表5 门诊病人UF-50与相差显微镜测定结果比较
3 讨论
本文实验分别选取了明确诊断的住院病人组86例，未明确诊断的门诊病人组95例，分别用相差显微镜和UF-50尿液沉渣分析仪检查。结果表明，以UF-50检测尿液为非均一性为肾小球病变的诊断依据，UF-50对于门诊组和住院组的敏感性分别为100%和96.8%(二者之间的差异无统计学意义，P>0.05)，特异性为51.6% 和58.3%(二者之间的差异有统计学意义，P<0.05)；Hyodo等研究报道，对于已经确证的肾小球或非肾小球疾病患者，尿液流式细胞仪分析尿液样本的敏感陛为50%，特异性为93%；国内马骏龙报道UF-50的敏感性为92.5%，特异性为78.2%；另一个前瞻性研究表明，在鉴别肾脏疾病时，显微镜检查(异形红细胞+棘形红细胞)有87%的敏感性和94%的特异性；尿液流式细胞仪(红细胞形态图谱)有74%的敏感性和84%的特异性。这四者之间存在一定的差距，其偏倚可能与病例的选择、病人用药状态、尿液的渗透压、样本处理、以及是否采用双盲法有关。以相差显微镜检测尿液为多形性为肾小球病变的诊断依据，门诊与住院病人组的敏感性分别为87.9%和85.5% ，特异性分别为72.6%和91.7%。用卡方检验比较相差显微镜在门诊与住院病人之间敏感性的差异无统计学意义，但是特异性的差异有统计学意义，P<0.05。由于住院病人的诊断明确，实验设计与操作过程未按双盲法实行；门诊病例由于诊断不明确(检查完毕后结合其它指标肾活检或造影确诊)，整个实验过程完全是按照双盲法进行，因此这可能是造成UF-50与相差显微镜同时在诊断试验特异性上表现出差异性的原因。本实验结果统计表明，在鉴别血尿来源方面，无论是门诊来源病例还是住院来源病例，UF-50检查的敏感性(100%和96.8%)高于相差显微镜(87.9%和85.5%)；而相差显微镜的特异性(72.6% 和91.7%)比UF-50(51.6%和58.3%)高。UF-50检测尿液红细胞受较多因素的影响，如尿渗透压、菌尿、尿PH值等均会导致尿液红细胞形态的改变。以门诊病例组为例，UF-50报告为非均一性48例，相差显微镜报告为多形性仅20例(见表4)，以相差显微镜为标准，UF-50的假阳性率高达38.4%。研究发现，50%的假阳性结果是由于WBC异常引起的，10.7%是由结晶体引起，35.7%由细菌引起的，4.6%原因不明。这是由于一些WBC、细菌、结晶体等在形态、大小、染色性上与红细胞类似，仪器不能够完全排除这些因素对红细胞计数的干扰，造成散射图上有交叉分布，导致UF-50在红细胞计数与形态学鉴别上的假阳性率增高。现今的血尿来源判断存在多种策略与方案。本实验结果再次证明：用相差显微镜定量尿液中的红细胞数量和形态学判断是准确、有效、特异性好，能够协助临床医生定位血尿来源，但是其操作繁琐、精密度差、劳动力耗费较大、不能够自动化检测，另外样本中红细胞绝对数量的不足和操作者自身存在的主观性也是误差的来源之一。与相差显微镜方法比较，尿沉渣流式分析仪UF-50显著提高了红细胞计数的准确度与精密度，而且大大节省了劳动力，也利于动态观察药物疗效和判断预后，然而它在临床应用过程中出现一个严重的缺陷：干扰因素太多、敏感性高、特异性差，而且缺乏一个在国际上广泛认可的测定程序。因此在判断血尿来源时，未离心尿液体外活体相差显微镜检查仍然被认为是最佳的候选参考方法。现今最流行的方法是在进行血尿来源初筛时将UF-50与干化学试纸条同时使用，尿液沉渣分析专家系统就是在用户自定义医学决定水平的基础上结合这二种方法初步判断红细胞信息，然后用相差显微镜确认。此方案的实行将在不减少临床应用价值的同时降低相差显微镜复查率、节省报告时间与医疗费用，同时可以被融合到临床实验室尿沉渣检查标准化程序中。
参考文献
[1] 马骏龙，丛玉隆，陈淑云，等.全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞鉴别血尿来源的探讨[J].中华医学检验杂志，1997；20(5)：305
[2] 高飞，陈伟，邓少丽，等.全自动尿沉渣分析仪对血尿定位诊断的评价.第三军医大学学报，2002；24(6)：740-742
[3] Hyodo E，King H.Automated Methods in Urinalysis.Clin Lab Sci 1998；11(1)：44-46
[4] 李幼姬，叶任高，李仕梅.诊断肾小球血尿的一种简便方法[J].中华内科杂志，1984；23(2)：99
[5] KdalerAM，CAln ~ ron JS，Gnmfeld JP.Odord University Press.1988：21
[6] 熊立凡，顾晓菁，董晓蓓.尿棘形红细胞在肾性和非肾性血尿鉴别中的意义[J].上海医学检验杂志，2000；15(2)：74
作者单位：556000 贵州省凯里市418医院
【关键词】血尿；UF-50；相差显微镜；尿液；红细胞
The phase contrast microscope and the UF 150 urines slime analyzer originates in the distinction at the hematuria the comparison
WANG Xian-he
【Abstract】goal：Appraises UF-50 and the phase contrast microscope originates in the distinction at the hematuria the value. The method selection kidney internal medicine department outpatient service case of illness 95 examples and are hospitalized the case of illness 86 examples，separately uses UF-50 and in the phase contrast microscope inspection analysis urine the red blood cell information. The result and is hospitalized origin case of illness regarding the outpatient service origin case of illness，the UF-50 inspection sensitivity (100% and 96.5%) is higher than the phase contrast microscope (87.9% and 85.5%)，P<0.05But the phase contrast microscope specificity (72.6% and 91.7%) is higher than UF-50 (51.6% and 58.3%)，P<0.05Conclusion UF-50 and the phase contrast microscope union use is the hematuria originates the distinction the best strategy.
【Key word】hematuria；UF-50；Phase contrast microscope；Urine；Red blood cell
目前，在临床上较为经典的鉴别血尿来源的方法一般以相差显微镜检查尿液红细胞形态作为鉴别指标。近年来全自动尿沉渣分析仪的应用大幅提高了尿沉渣计数的准确度、精密度，节省了劳动力，并提供了尿液中红细胞的相应参数，也可以用作评估血尿来源。因此随着新的尿沉渣分析方法的出现，迫切需要对所有的有关血尿来源检查诊断策略进行评估分析；同时由于病人医疗费用的限制、临床医生对实验室检查结果报告时间和准确度的要求等都需要我们研究此类问题。本文收集二组血尿患者分别进行UF-50全自动尿液沉渣分析和相差显微镜检查红细胞形态，评价UF-50与相差显微镜的分析效能，为常规临床实验室的鉴别血尿来源诊断策略提供参考。
1 材料与方法
1.1 病例资料
1.1.1 肾病门诊病人95例。本组病人均为2007年1-12月本院肾内科门诊病人，其中男37例，女58例，年龄28-85岁，平均(51.2士22.4)岁。经详细病史、临床症状怀疑为肾小球肾炎或肾盂肾炎或膀胱炎等疾病，尿液干化学检查隐血试验阳性，用UF-50尿液沉渣分析和相差显微镜检查。对于初步诊断为肾炎者行肾活检确诊，计33例；非肾小球疾病者用造影(膀胱镜或B超)确诊，计62例。
1.1.2 肾内科住院病人86例。本组病人均为2007年1-12月本院住院病人，其中男35例，女51例，年龄17-68岁，平均(36.2士18.9)岁。其中62例经详细病史、临床化学与免疫学检查、肾活检证实为肾小球疾病包括IgA肾病(12例) 系膜增殖性肾小球肾炎(36例)、膜性肾小球肾炎(6例)、微小病灶性肾小球肾炎(6例)；24例用造影(膀胱镜或B超)确诊为非肾小球病变包括膀胱炎(12例)、肾结石8例、尿路感染6例。
1.2 仪器与试剂。UF-50尿液沉渣分析仪及其配套试剂(SYS-MEX)，相差显微镜(OLYMPUS)，Mejer-600干化学尿液分析仪。
1.3 方法
1.3.1 UF-50尿液沉渣分析仪检查取尿液10ml(住院病人取新鲜中段晨尿，门诊病人取新鲜中段随机尿)于专用测定管内。仪器在测定前使用专用质控液检测仪器状态，尿液标本在收集2小时内测试完毕。参考nyodo提供的参考标准，80%红细胞前向散射强度(FSC)84ch为均一性红细胞，即为非肾小球性血尿；红细胞前向散射强度(FSC)126ch且<80%红细胞>84ch为非均一性红细胞，即为肾小球性血尿；红细胞前向散射强度介于二者之间称为混和性红细胞。
表1 86例住院肾病病人UF-50与相差显微镜测定结果
表2 95例门诊肾病病人UF-50 与相差显微镜测定结果
表3 门诊病人UF-50与相差显微镜测定结果比较
1.3.2 相差显微镜检查。上述标本做UF-50尿液沉渣检查时，取10mL离心1500RPM，5min，弃去上清液，留0.5ml混匀直接涂片：1O个视野，50个红细胞，观察红细胞的形态。尿液标本在收集2小时内测试完毕。多形红细胞>70%或多形红细胞<70%但棘形红细胞>5%，即为肾小球性血尿；多形红细胞<20%为基本正常，即为非肾小球性血尿；介于二者之间为混和性血尿。
1.3.3 统计分析。UF-50尿液沉渣分析仪与相差显微镜检查这二种方法之间敏感性与特异性的比较采用卡方检验。P<0.05表示差异有统计学意义。所有数据的录入及统计分析均采用统计软件SPSS11.0进行。
2 结果
2.1 以UF-50检测尿液为非均一性为肾小球病变的诊断依据，住院病人组的敏感性为96.8%，特异性为58.3%；门诊病人组的敏感性为100%，特异性为51.6%。用卡方检验比较UF-50在门诊与住院病人之间敏感性的差异无统计学意义，但是特异性的差异有统计学意义，P<0.05。
2.2 以相差显微镜检测尿液为多形性为肾小球病变的诊断依据，住院病人组的敏感性为85.5%，特异性为91.7%；门诊病人组的敏感性为87.9%，特异性为72.6%。用卡方检验比较相差显微镜在门诊与住院病人之间敏感性的差异无统计学意义，但是特异性的差异有统计学意义，P<0.05。
2.3 对于门诊病人组，UF-50检查的敏感性(99.9%)高于相差显微镜的敏感性(87.9%)；UF-50检查的特异性(50.6%)低于相差显微镜的特异性(71.6%)。
表4 门诊病人UF-50与相差显微镜测定结果比较
P﹤0.01
表5 门诊病人UF-50与相差显微镜测定结果比较
3 讨论
本文实验分别选取了明确诊断的住院病人组86例，未明确诊断的门诊病人组95例，分别用相差显微镜和UF-50尿液沉渣分析仪检查。结果表明，以UF-50检测尿液为非均一性为肾小球病变的诊断依据，UF-50对于门诊组和住院组的敏感性分别为100%和96.8%(二者之间的差异无统计学意义，P>0.05)，特异性为51.6% 和58.3%(二者之间的差异有统计学意义，P<0.05)；Hyodo等研究报道，对于已经确证的肾小球或非肾小球疾病患者，尿液流式细胞仪分析尿液样本的敏感陛为50%，特异性为93%；国内马骏龙报道UF-50的敏感性为92.5%，特异性为78.2%；另一个前瞻性研究表明，在鉴别肾脏疾病时，显微镜检查(异形红细胞+棘形红细胞)有87%的敏感性和94%的特异性；尿液流式细胞仪(红细胞形态图谱)有74%的敏感性和84%的特异性。这四者之间存在一定的差距，其偏倚可能与病例的选择、病人用药状态、尿液的渗透压、样本处理、以及是否采用双盲法有关。以相差显微镜检测尿液为多形性为肾小球病变的诊断依据，门诊与住院病人组的敏感性分别为87.9%和85.5% ，特异性分别为72.6%和91.7%。用卡方检验比较相差显微镜在门诊与住院病人之间敏感性的差异无统计学意义，但是特异性的差异有统计学意义，P<0.05。由于住院病人的诊断明确，实验设计与操作过程未按双盲法实行；门诊病例由于诊断不明确(检查完毕后结合其它指标肾活检或造影确诊)，整个实验过程完全是按照双盲法进行，因此这可能是造成UF-50与相差显微镜同时在诊断试验特异性上表现出差异性的原因。本实验结果统计表明，在鉴别血尿来源方面，无论是门诊来源病例还是住院来源病例，UF-50检查的敏感性(100%和96.8%)高于相差显微镜(87.9%和85.5%)；而相差显微镜的特异性(72.6% 和91.7%)比UF-50(51.6%和58.3%)高。UF-50检测尿液红细胞受较多因素的影响，如尿渗透压、菌尿、尿PH值等均会导致尿液红细胞形态的改变。以门诊病例组为例，UF-50报告为非均一性48例，相差显微镜报告为多形性仅20例(见表4)，以相差显微镜为标准，UF-50的假阳性率高达38.4%。研究发现，50%的假阳性结果是由于WBC异常引起的，10.7%是由结晶体引起，35.7%由细菌引起的，4.6%原因不明。这是由于一些WBC、细菌、结晶体等在形态、大小、染色性上与红细胞类似，仪器不能够完全排除这些因素对红细胞计数的干扰，造成散射图上有交叉分布，导致UF-50在红细胞计数与形态学鉴别上的假阳性率增高。现今的血尿来源判断存在多种策略与方案。本实验结果再次证明：用相差显微镜定量尿液中的红细胞数量和形态学判断是准确、有效、特异性好，能够协助临床医生定位血尿来源，但是其操作繁琐、精密度差、劳动力耗费较大、不能够自动化检测，另外样本中红细胞绝对数量的不足和操作者自身存在的主观性也是误差的来源之一。与相差显微镜方法比较，尿沉渣流式分析仪UF-50显著提高了红细胞计数的准确度与精密度，而且大大节省了劳动力，也利于动态观察药物疗效和判断预后，然而它在临床应用过程中出现一个严重的缺陷：干扰因素太多、敏感性高、特异性差，而且缺乏一个在国际上广泛认可的测定程序。因此在判断血尿来源时，未离心尿液体外活体相差显微镜检查仍然被认为是最佳的候选参考方法。现今最流行的方法是在进行血尿来源初筛时将UF-50与干化学试纸条同时使用，尿液沉渣分析专家系统就是在用户自定义医学决定水平的基础上结合这二种方法初步判断红细胞信息，然后用相差显微镜确认。此方案的实行将在不减少临床应用价值的同时降低相差显微镜复查率、节省报告时间与医疗费用，同时可以被融合到临床实验室尿沉渣检查标准化程序中。
参考文献
[1] 马骏龙，丛玉隆，陈淑云，等.全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞鉴别血尿来源的探讨[J].中华医学检验杂志，1997；20(5)：305
[2] 高飞，陈伟，邓少丽，等.全自动尿沉渣分析仪对血尿定位诊断的评价.第三军医大学学报，2002；24(6)：740-742
[3] Hyodo E，King H.Automated Methods in Urinalysis.Clin Lab Sci 1998；11(1)：44-46
[4] 李幼姬，叶任高，李仕梅.诊断肾小球血尿的一种简便方法[J].中华内科杂志，1984；23(2)：99
[5] KdalerAM，CAln ~ ron JS，Gnmfeld JP.Odord University Press.1988：21
[6] 熊立凡，顾晓菁，董晓蓓.尿棘形红细胞在肾性和非肾性血尿鉴别中的意义[J].上海医学检验杂志，2000；15(2)：74
作者单位：556000 贵州省凯里市418医院