HPLC法测定人红细胞中的S-腺苷同型半胱氨酸和S-腺苷甲硫氨酸

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目的建立HPLC法测定人红细胞中S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)和S-腺苷甲硫氨酸(SAM)浓度的方法。方法人红细胞经同体积醋酸盐缓冲液稀释后,经10%高氯酸蛋白沉淀后直接进样。采用Athena C18 WP柱(150 mm×4.6 mm,3μm),柱温35℃,流动相为含5 mmol·L-1庚烷磺酸钠的50 mmol·L-1 Na H2PO4缓冲液(pH 4.0)-甲醇(80:20,v/v),流速:1.0 m L·min-1,检测波长254 nm。采用外标法定量。结果SAH和SAM分别在0.025~10 mg·L-1和0.05~20 mg·L-1内线性关系良好,SAH和SAM的日内、日间RSD均<12%,加样回收率在95.5%~106.3%,样品提取后在24 h内稳定性良好。结论该法快速、简便、准确,适用于SAH和SAM的体内分析检测。
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