【摘 要】
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【目的】通过构建DNA结合膜蛋白(DNA-binding membrance protein,Dbp)基因的缺失株,探究Dbp基因对猪链球菌2型强毒株毒力的影响。【方法】通过PCR检测Dbp基因的分布。利用同
【基金项目】
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国家自然科学基金优秀青年基金项目(No.31322054);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(No.NCET-110671,NCET-110671);农业部行业化益性专项项目(No.201303041)
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【目的】通过构建DNA结合膜蛋白(DNA-binding membrance protein,Dbp)基因的缺失株,探究Dbp基因对猪链球菌2型强毒株毒力的影响。【方法】通过PCR检测Dbp基因的分布。利用同源重组原理构建Dbp基因上下游片段的重组质粒,将构建好的质粒电转入ZY05719感受态细胞中,筛选Dbp缺失突变株,通过PCR及测序分析对其进行验证。生物学特性分析比较缺失株ΔDbp和野毒株ZY05719在生长速率、形态特征、毒力等方面的差异。【结果】Dbp基因为猪链球菌2型强毒株中相对保守基因,构建了Dbp基因缺失株ΔDbp。体外实验结果显示Dbp基因缺失株的生长速率在对数期减慢,并且缺失株ΔDbp的荚膜同野毒株存在显著差异,斑马鱼实验结果表明缺失株ΔDbp毒力下降。【结论】Dbp与猪链球菌2型的毒力相关,在猪链球菌2型的致病过程中起一定的作用,这丰富了对该菌致病机理的认识。
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