MCF10A-Er-Src诱导转化模型的构建

来源 :医学研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xzw333

【摘要】

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目的构建能够被他莫西芬（tamoxifen,TAM）激活的MCF10A-Er-Src诱导转化模型.方法利用PCR扩增法分别获得雌激素受体配体结合结构域序列（hbER）和Src序列,并将其分别插入到改造后的

【作者】

：

任雪程谟斌张业沈珝琲

【机构】

：

中国医学科学院基础医学研究所,北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系、医学分子生物学国家重点实验室

【出处】

：

医学研究杂志

【发表日期】

：

2014年10期

【关键词】

：

人乳腺表皮细胞雌激素受体配体结合结构域-Src融合蛋白他莫西芬细胞转化 Human mammary epithelial cells（MCF10A） E

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目的构建能够被他莫西芬（tamoxifen,TAM）激活的MCF10A-Er-Src诱导转化模型.方法利用PCR扩增法分别获得雌激素受体配体结合结构域序列（hbER）和Src序列,并将其分别插入到改造后的反转录病毒表达载体pMSCV-FLAG-HA中,构建ER-Src融合蛋白表达质粒.包装pMSCV-ER-Src-FLAG-HA重组反转录病毒,感染MCF10A,利用基因组PCR和Western blot法筛选能够稳定表达外源融合蛋白ER-Src的细胞系.利用免疫沉淀（IP）和Western blot法

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