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摘 要：随着科学技术的迅速发展，我国的医疗事业和医疗检测事业也得到了较大的进步。青霉素是在临床医学中具有重要作用的抗生素类物质，能够抵抗病菌的感染，变相提高机体的免疫能力。近年来，国家加大了对医药的质量安全的认定，同时也保证了社会生活的稳定进行。文章对高效液相色谱法在青霉素生产中的应用进行了分析，根据一系列的适用性试验和样品验证，通过对吸收峰值的分析，确定了青霉素中的主要成分。同时也证明了高效液相色谱法的检测简便性和高效性。
关键词：青霉素钠；青霉素钾；高效液相色谱法；有关物质
在青霉素生产工艺中，需要对生产过程进行成分的认定，但是在中国药典的记载中，还没有适合的检测方案。但是相似的药品检测已经在高效液相色谱法中得到了成分的检测。高效液相色谱法主要是以液体为流动相，并在高压的作用下，将混合药物在设备中进行成分的分离，同时在检测設施中对相应的成分进行认定。由于其具有高灵敏度，该设备已经在化工和医学方面有了较广泛的应用。
一、仪器与试药
Agilent1100型色谱系统。青霉素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为130437—200502，含量为88.8%）；青霉素钠、注射用青霉索钠、青霉素钾、注射用青霉素钾（均为国内药厂产品）；磷酸二氢钾、磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯。
二、方法与结果
1、色谱条件选择
流动相：USP29，BP2007，EP5.0中，青霉素钠（钾）的有关物质采用梯度洗脱，流动相A为磷酸盐缓冲液一甲醇一水（10：30：60），流动相B为磷酸盐缓冲液一甲醇一水（10：40：50），这两种流动相黏度较大，会使柱压过大，因此参照2005年版《中国药典（二部）》含量测定方法，以磷酸盐缓冲液和乙腈为流动相。检测波长：利用DAD检测器的全波长扫描，在210～300nm波长范围内选取不同波长，对青霉素的起始物、中间体和主要杂质的HPLC图进行比较，结果在225nm波长处色谱峰信息最多，且各峰分离良好。
洗脱方法：USP29，BP2007，EP5.0中青霉索钠（钾）的有关物质测定采用梯度洗脱，2005年版《中国药典（二部）》中含量测定为等度洗脱。分别按梯度洗脱和等度洗脱试验。结果表明，等度洗脱主峰的保留时间为40.02min，在66.26min处有一杂峰，按一般要求有关物质检查保留时间至少是主峰保留时间的2倍，等度洗脱运行时间过长，因此选择梯度洗脱方法。
2、色谱条件与系统适用性试验
3、可能的有关物质确定
根据现有生产工艺，在成品的青霉素原料中可能会有加入的前体苯乙酸及中间体产物6一APA。β一内酰胺是结构中最不稳定的部分，易发生水解和分子重排，主要杂质有青霉噻唑酸、青霉酸、青霉醛、青霉胺、俚一青霉噻唑酰基羟胺酸、青霉烯酸等。
4、方法学考察
专属性考察：取苯乙酸和6一APA适量，用水溶解后，即得起始物及中间体样品溶液，备用。将配制好的溶液在上述色谱条件下测定，发现起始物及中间体与主峰均达到基线分离。将样品进行酸、碱、强光、高温、高湿及氧化破坏，并将处理好的溶液在上述液相色谱条件下测定，发现加速破坏所产生的杂质峰与主峰均达到基线分离。
5、样品检测
三、结果与讨论
在高效液相色谱法中需要借助流动相进行青霉素的应用分析，但是在实际的检测中，在青霉素的流动相中存在甲醇物质，虽然对青霉素物质的检测没有误差的影响，但是在青霉素盐在于甲醇的混合中，会增加物质的粘性，不利于液相色谱吸收峰值的建立，往往都是在较大的柱压环境中，实现了设备的正常使用，因此要更换流动相中的甲醇物质，通过实验表明乙腈作为适合。
上述实验中分别采用于市场环境中的青霉素物质，通过高效液相色谱法分析表明，青霉素的杂质含量都较低，符合国家的药品检测标准。其中在杂质含量是否标准的测定中，要以溶液中主峰的吸收峰面积为对照，计算每种杂质吸收峰面积之和，通过面积和不得大于主峰面积的1.0%为标准进行数据验证。并要严格按照高效液相色谱法的实验流程检测，提高药品检测的精确性。本法不仅可以有效控制药品的质量，大大提高标准的严谨性，还使国内产品与国际产品同步，为打开国际市场创造了条件，促进了国内医疗事业的发展。
结语：通过对青霉素生产过程的质量和成分认定，能够确立药品的安全性，提高医疗药品的质量安全，并在严格的药品认证中建立统一的标准，并利用准确的验证方法，提高药品的检测水平。高效液相色谱法在近年来的药品检测中应用十分广泛，并通过高效和精准的数据分析，提高了药品质量监督水平，保障了人们医疗安全的同时，也提高了我国的医药建设水平。在未来的发展中，还要对医药的验证方法进行探索，提高医药的科学化建设。
参考文献：
[1] 胥秀英，谢云，刘红，张红兰，郑一敏.反向高效液相色谱法在吗替麦考酚酸酯合成新工艺检测中的应用[J].重庆理工大学学报，2014（01）.
[2] 李宝全.谈青霉素的生产工艺过程[J].黑龙江科技信息，2015（02）.
[3] 吴旭国.浅谈青霉素的生产工艺过程[J].民营科技，2012（02）.
关键词：青霉素钠；青霉素钾；高效液相色谱法；有关物质
在青霉素生产工艺中，需要对生产过程进行成分的认定，但是在中国药典的记载中，还没有适合的检测方案。但是相似的药品检测已经在高效液相色谱法中得到了成分的检测。高效液相色谱法主要是以液体为流动相，并在高压的作用下，将混合药物在设备中进行成分的分离，同时在检测設施中对相应的成分进行认定。由于其具有高灵敏度，该设备已经在化工和医学方面有了较广泛的应用。
一、仪器与试药
Agilent1100型色谱系统。青霉素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为130437—200502，含量为88.8%）；青霉素钠、注射用青霉索钠、青霉素钾、注射用青霉素钾（均为国内药厂产品）；磷酸二氢钾、磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯。
二、方法与结果
1、色谱条件选择
流动相：USP29，BP2007，EP5.0中，青霉素钠（钾）的有关物质采用梯度洗脱，流动相A为磷酸盐缓冲液一甲醇一水（10：30：60），流动相B为磷酸盐缓冲液一甲醇一水（10：40：50），这两种流动相黏度较大，会使柱压过大，因此参照2005年版《中国药典（二部）》含量测定方法，以磷酸盐缓冲液和乙腈为流动相。检测波长：利用DAD检测器的全波长扫描，在210～300nm波长范围内选取不同波长，对青霉素的起始物、中间体和主要杂质的HPLC图进行比较，结果在225nm波长处色谱峰信息最多，且各峰分离良好。
洗脱方法：USP29，BP2007，EP5.0中青霉索钠（钾）的有关物质测定采用梯度洗脱，2005年版《中国药典（二部）》中含量测定为等度洗脱。分别按梯度洗脱和等度洗脱试验。结果表明，等度洗脱主峰的保留时间为40.02min，在66.26min处有一杂峰，按一般要求有关物质检查保留时间至少是主峰保留时间的2倍，等度洗脱运行时间过长，因此选择梯度洗脱方法。
2、色谱条件与系统适用性试验
3、可能的有关物质确定
根据现有生产工艺，在成品的青霉素原料中可能会有加入的前体苯乙酸及中间体产物6一APA。β一内酰胺是结构中最不稳定的部分，易发生水解和分子重排，主要杂质有青霉噻唑酸、青霉酸、青霉醛、青霉胺、俚一青霉噻唑酰基羟胺酸、青霉烯酸等。
4、方法学考察
专属性考察：取苯乙酸和6一APA适量，用水溶解后，即得起始物及中间体样品溶液，备用。将配制好的溶液在上述色谱条件下测定，发现起始物及中间体与主峰均达到基线分离。将样品进行酸、碱、强光、高温、高湿及氧化破坏，并将处理好的溶液在上述液相色谱条件下测定，发现加速破坏所产生的杂质峰与主峰均达到基线分离。
5、样品检测
三、结果与讨论
在高效液相色谱法中需要借助流动相进行青霉素的应用分析，但是在实际的检测中，在青霉素的流动相中存在甲醇物质，虽然对青霉素物质的检测没有误差的影响，但是在青霉素盐在于甲醇的混合中，会增加物质的粘性，不利于液相色谱吸收峰值的建立，往往都是在较大的柱压环境中，实现了设备的正常使用，因此要更换流动相中的甲醇物质，通过实验表明乙腈作为适合。
上述实验中分别采用于市场环境中的青霉素物质，通过高效液相色谱法分析表明，青霉素的杂质含量都较低，符合国家的药品检测标准。其中在杂质含量是否标准的测定中，要以溶液中主峰的吸收峰面积为对照，计算每种杂质吸收峰面积之和，通过面积和不得大于主峰面积的1.0%为标准进行数据验证。并要严格按照高效液相色谱法的实验流程检测，提高药品检测的精确性。本法不仅可以有效控制药品的质量，大大提高标准的严谨性，还使国内产品与国际产品同步，为打开国际市场创造了条件，促进了国内医疗事业的发展。
结语：通过对青霉素生产过程的质量和成分认定，能够确立药品的安全性，提高医疗药品的质量安全，并在严格的药品认证中建立统一的标准，并利用准确的验证方法，提高药品的检测水平。高效液相色谱法在近年来的药品检测中应用十分广泛，并通过高效和精准的数据分析，提高了药品质量监督水平，保障了人们医疗安全的同时，也提高了我国的医药建设水平。在未来的发展中，还要对医药的验证方法进行探索，提高医药的科学化建设。
参考文献：
[1] 胥秀英，谢云，刘红，张红兰，郑一敏.反向高效液相色谱法在吗替麦考酚酸酯合成新工艺检测中的应用[J].重庆理工大学学报，2014（01）.
[2] 李宝全.谈青霉素的生产工艺过程[J].黑龙江科技信息，2015（02）.
[3] 吴旭国.浅谈青霉素的生产工艺过程[J].民营科技，2012（02）.