【摘 要】
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目的 观察急性肾损伤（AKI）后恢复过程中肾组织内Wnt-β-catenin信号分子表达的分布及变化,探讨Wnt-β-catenin信号通路在AKI修复过程中的作用.方法 （1）应用BAT-gal转基因报告鼠建立急性肾缺血再灌注损伤（IRI）模型,在IRI后1 d断尾取血,并于IRI后第2和7天处死报告鼠取血并收集肾脏标本.肾组织切片行PAS染色观察肾病理改变及X-gal-LTL（近曲小管标记物）
【机 构】
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河北医科大学第二医院肾内科,石家庄050000,河北医科大学第三医院肾内科
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目的 观察急性肾损伤（AKI）后恢复过程中肾组织内Wnt-β-catenin信号分子表达的分布及变化,探讨Wnt-β-catenin信号通路在AKI修复过程中的作用.方法 （1）应用BAT-gal转基因报告鼠建立急性肾缺血再灌注损伤（IRI）模型,在IRI后1 d断尾取血,并于IRI后第2和7天处死报告鼠取血并收集肾脏标本.肾组织切片行PAS染色观察肾病理改变及X-gal-LTL（近曲小管标记物）、X-gal-NKCC2（髓袢标记物）、X-gal-DBA（集合管标记物）免疫荧光组织化学双重染色,观察Wnt-β-catenin信号的分布、表达与变化.（2）应用野生型小鼠建立IRI模型,于IRI后第2、5、7天处死小鼠获取肾脏标本用Western印迹方法检测Wnt4及其共同受体低密度脂蛋白受体相关蛋白6（Lrp6）的表达水平.结果 IRI小鼠肾损伤后第2天,PAS结果显示损伤肾脏的肾小管上皮细胞排列紊乱,可见明显的肾小管上皮细胞脱落及基底膜裸露,管腔内可见脱落的细胞和细胞碎片;7 d时小鼠肾小管上皮细胞损伤面积较2 d时明显缩小.X-gal染色显示第2天损伤的肾脏皮质和外髓质层中可见少数肾小管出现Wnt信号的表达,间质中Wnt信号的反应较高,第7天与第2天比较,Wnt信号表达明显增强.Western印迹结果显示,Wnt4于IRI后2 d增高,第5、7天亦较第2天明显增高;其共同受体磷酸化Lrp6代表激活的Wnt-β-catenin信号,在IRI 2 d后明显增高,而在无损伤成鼠肾组织中未检测到.免疫双染提示主要是近曲小管和髓袢的上皮细胞对Wnt信号通路应答.结论 急性肾损伤时Wnt-β-catenin信号通路被激活,可能参与了肾小管上皮细胞的修复机制。
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