【摘 要】
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目的从双齿围沙蚕消化道中克隆并表达具有纤维蛋白溶解活性的蛋白，方法提取沙蚕消化道上皮细胞RNA，逆转录获得cDNA。根据丝氨酸蛋白酶家族基因保守序列设计兼并引物，筛选包含丝
【机 构】
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青岛大学医学院,上海市疾病预防控制中心
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目的从双齿围沙蚕消化道中克隆并表达具有纤维蛋白溶解活性的蛋白，方法提取沙蚕消化道上皮细胞RNA，逆转录获得cDNA。根据丝氨酸蛋白酶家族基因保守序列设计兼并引物，筛选包含丝氨酸蛋白家族保守位点的阳性克隆，进行核苷酸测序。根据该序列利用5′RACE技术进行扩增，将获得的基因片段克隆到pMAI-p2载体中，在大肠杆菌BL2l中进行融合表达。表达的融合蛋白经过直链淀粉树脂亲和色谱和DEAE-Sepharose 4B纯化后，纤维蛋白平板法检测其溶栓活性。结果cDNA经5’RACE扩增获得长度为260bp的基因片段
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