论文部分内容阅读
【摘要】 目的 了解2013年某教学医院大肠埃希菌的分离情况及对抗生素的耐药状况。方法 2013年1月1日至2013年12月31日共收集到某教学医院分离到的大肠埃希菌817株，采用全自动微量稀释法进行药物敏感性试验，试验结果以CLSI2012年版标准判读。结果 大肠埃希菌对替加环素、亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率均大于97%；对呋喃妥因和头孢吡肟的敏感率均大于80%；对头孢西丁的敏感率为73.9；对阿莫西林/克拉维酸、氨曲南、妥布霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、头孢曲松、氨苄西林、头孢唑啉的敏感率均低于70%；ESBL菌株的检出率为42.1%。结论 对大肠埃希菌检出的致病菌应根据各个医院具体的耐药监测数据来使用抗生素，以达到最佳的临床治疗效果。
【关键词】 大肠埃希菌；大肠杆菌；耐药；耐药性监测
文章编号：1004-7484（2014）-06-3522-02
【Abstract】Objective To investigate the drug resistance to antibiotics situation of a teaching hospital of Escherichia coli in 2013.Methods A total of 817 isolated strains of Escherichia coli were collected in a teaching hospital from January 1，2013 to 2013 December 31，the drug sensitivity test was carried out using automatic micro dilution method，the test results were analysed according to the 2012 edition of the CLSI standard.Results Escherichia coli to tigecycline，imipenem，Amikacin and piperacillin/tazobactam sensitive rates were higher than 97%；the sensitivity rate to nitrofurantoin and cefepime were higher than 80%；the sensitivity rate to cefoxitin was 73.9；the sensitivity rate of amoxicillin/clavulanic acid，ammonia sensitive，tobramycin，gentamicin，levofloxacin，ciprofloxacin，cotrimoxazole，ceftriaxone，ampicillin，cefazolin were less than 70%；the detection rate of ESBL strains were 42.1%.Conclusion In order to achieve the best effect of clinical treatment，the antibiotics should be administered according to drug resistance monitoring data of each hospital.
【Key words】 Escherichia coli；Escherichia coli；drug resistance；resistance monitoring
大腸埃希菌寄居在人和动物的肠道内的正常菌群，也可以引起社区感染性疾病和医院感染性疾病。大肠埃希菌又称大肠杆菌，主要引起泌尿生殖道的感染，也可引起其他感染性疾病。大肠埃希菌最重要的耐药机制是产生超广谱β-内酰胺酶[1]。对于这种细菌临床上为重度感染首选碳青霉烯类抗生素进行治疗[2]。大肠埃希菌是医院感染的主要条件致病菌，因其多重耐药特性而引起广泛关注[3]。对大肠埃希菌进行长期动态的耐药性监测，指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。现就2013年某院大肠埃希菌的耐药监测结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 收集2013年1月1日至2013年12月31日的临床分离的大肠埃希菌，剔除同一患者相同部位的重复菌株，共817株，按《全国临检操作规程（第三版）》进行细菌鉴定及药敏试验。
1.2 方法 药敏试验采用VITEK-2全自动微生物鉴定药敏检测系统（法国生物梅里埃公司）进行。抗菌药物品种见本文结果部分，全自动药敏试验卡片为VITEK-2检测系统配套产品（法国生物梅里埃公司）。
1.3 统计学分析 药敏试验采用自动化仪器微量肉汤稀释法进行。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922和ATCC35218。每周进行1次质控，药敏试验结果按CLSI2012年版标准判读。统计分析数据采用WHONET5.6软件统计分析。
2 结 果
2.1 每月分离细菌分布图 见图1。
2.2 大肠埃希菌耐药性分析 见表1。
3 讨 论
大肠埃希菌是埃希菌属（Escherichia）最为常见的菌种，是本菌属模式种，是肠道菌群中的重要代表种。大肠埃希菌为直短杆状革兰阴性杆菌，多数有周鞭毛，能运动，有菌毛。本菌兼性厌氧，营养要求不高，在血平板和普通平板上生长为圆形、湿润、灰白色菌落，在肠道选择性培养基上发酵乳糖产酸，依培养基指示剂不同而形成不同颜色的菌落，在麦康凯上为红色菌落。大肠埃希菌具有肠杆菌科所有的抗原结构。
大肠埃希菌的致病物质包括侵袭力和毒素。侵袭力与K抗原和菌毛密切相关，K抗原有抗吞噬及抵抗抗体和补体的作用；菌毛可粘附于宿主粘膜表面定值，继而侵犯宿主引起感染性疾病。内毒素能引起宿主发热。休克、弥漫性血管内溶血等病理生理反应。肠产毒性大肠埃希菌能产生不耐热肠毒素和耐热肠毒素，它们均可引起肠道细胞中cAMP水平的升高，肠液分泌增加而导致腹泻。 大肠埃希菌是临床感染中最常见的革兰阴性杆菌，也是医院感染常见病原菌，可引起人体各部位的感染，以尿路感染最为常见。该菌还可以引起菌血症、肺炎、新生儿脑膜炎、胆道感染、术后腹腔感染及伤口创面感染等。长与厌氧菌、粪肠球菌等菌混合感染，其脓液常有粪臭味。
大肠埃希菌对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂敏感，对青霉素、第1、2、3代头孢菌素及单环菌素耐药。其耐药性主要大肠埃希菌产生广谱β-内酰胺酶所致。ESBL包括TEM、SHV和非TEM、SHV型，由智力介导产生。ESBL是目前肠杆菌科细菌，尤其是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对广谱头孢菌素产生耐药性的最主要的原因[4]。
大肠杆菌的耐药机制分为天然耐药机制和获得性耐药机制。天然耐药也叫固有耐药，指的是细菌的耐药性的产生是细菌所固有的，与细菌的遗传和进化密切相关而不依赖于抗生素的存在[5]。固有性耐药机制主要包括基因突变引起的耐药基因的改变以及细胞膜药物泵出机制的产生。获得性耐药指的是细菌在抗生素选择性压力下引起基因突变。目前大肠埃希菌的耐药机制主要有5种；抗生素靶位的改变；酶对抗生素的修饰和破坏；主动外排机制的产生；细菌外膜通透性的改变[6]；质粒介导的耐药性[7]。
本研究提示大肠埃希菌对替加环素、亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率均大于97%；对呋喃妥因和头孢吡肟的敏感率均大于80%；对头孢西丁的敏感率为73.9；对阿莫西林/克拉维酸、氨曲南、妥布霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、头孢曲松、氨苄西林、头孢唑啉的敏感率均低于70%；ESBL菌株的检出率为42.1%。
本研究中ESBL的检出率为42.1%，可能是导致大腸埃希菌对青霉素及酶抑制剂、头孢菌素耐药的主要原因。其机制与耐药菌产生β-内酰胺酶密切相关。主要包括作用于青霉素的青霉素酶和主要作用于头孢菌素的头孢菌素没，以及作用于两者的中间类型。β-内酰胺酶可以水解该类药物的β-内酰胺环是酰胺键断裂而失去抗菌活性。如果针对性的研究头孢菌素的酶抑制剂，也许在一定程度上会对耐药菌产生作用。这也是为什么本研究中大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为97.0%。但是其具体的耐药机制以及分子流行病学的状况有待于进一步的研究。
近年来，随着抗生素在畜牧等养殖业中的大量应用，大量的抗生素不断进入水、土壤、河流等环境中[8]。使得大肠杆菌的耐药普不断扩大[9-13]，耐药水平不断提高，给我国居民的健康带来潜在危害[14]。因此除要规范临床的合理使用抗生素外，畜牧等养殖产业抗生素的合理使用也十分重要。
参考文献
[1] 方洁，何乐，何娟，倪语星.上海交通大学医学院附属瑞金医院大肠杆菌耐药率与抗菌药物使用强度8年的相关性分析[J].药学服务与研究，2013（02）：85-88.
[2] 谢刚，安昌勇，张才全，唐华.肠道抗生素行肠道准备后对大肠杆菌耐药的影响[J].中国临床药理学与治疗学，2013（04）：433-436.
[3] 郭邦成，闫立群，郝琼，等.宁夏致泻性大肠杆菌的流行特征及耐药现状研究[J].宁夏医学杂志，2013（04）：307-309.
[4] 李佩波.大肠埃希菌耐药及机制研究进展[J].西南军医，2011，13（1）：95-97.
[5] 赵晓丽，胡大春.大肠埃希菌耐药机制的研究进展[J].国际检验医学杂志，2007，28（5）：438-441.
[6] 李俐，蒋燕群.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌外膜蛋白与耐药机制的研究进展[J].上海交通大学学报（医学版），2010，30（11）：1433-1436.
[7] 赵庆英，刘德梦.大肠埃希菌耐药机制研究进展[J].国外医药：抗生素分册，2010，31（4）：190-S4.
[8] 崔艳艳，高洪，严玉霖，等.大肠埃希菌外膜蛋白F与细菌耐药性研究进展[J].动物医学进展，2013，34（6）：164-166.
[9] 牛玉娟，等.泰安及周边地区禽大肠杆菌分离鉴定及耐药分析[J].家禽科学，2013（12）：6-9.
[10] 陈燕杰，裴亚玲，吴华，等.鸭源大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因的检测与传播扩散机制[J].中国人兽共患病学报，2013（02）：138-141+147.
[11] 陈惠凤.动物园鸟类大肠杆菌耐药情况调查[J].中国畜禽种业，2013（06）：129-131.
[12] 贺志沛，王玲飞，刘建华，等.宠物犬源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR的检测及药物敏感性分析[J].中国畜牧兽医，2013（06）：211-215.
[13] 陈伟，张永正，汪雪雁，薛秀恒，涂健，祁克宗.动物源性大肠杆菌ESBLs类耐药基因与HPI基因的双重PCR检测及相关性分析[J].中国兽医科学，2013（08）：800-805.
[14] 刘淑芬，张敏.大肠埃希菌产ESBLs进展及耐药性调查[J].河北医药，2014（5）：783-784.
【关键词】 大肠埃希菌；大肠杆菌；耐药；耐药性监测
文章编号：1004-7484（2014）-06-3522-02
【Abstract】Objective To investigate the drug resistance to antibiotics situation of a teaching hospital of Escherichia coli in 2013.Methods A total of 817 isolated strains of Escherichia coli were collected in a teaching hospital from January 1，2013 to 2013 December 31，the drug sensitivity test was carried out using automatic micro dilution method，the test results were analysed according to the 2012 edition of the CLSI standard.Results Escherichia coli to tigecycline，imipenem，Amikacin and piperacillin/tazobactam sensitive rates were higher than 97%；the sensitivity rate to nitrofurantoin and cefepime were higher than 80%；the sensitivity rate to cefoxitin was 73.9；the sensitivity rate of amoxicillin/clavulanic acid，ammonia sensitive，tobramycin，gentamicin，levofloxacin，ciprofloxacin，cotrimoxazole，ceftriaxone，ampicillin，cefazolin were less than 70%；the detection rate of ESBL strains were 42.1%.Conclusion In order to achieve the best effect of clinical treatment，the antibiotics should be administered according to drug resistance monitoring data of each hospital.
【Key words】 Escherichia coli；Escherichia coli；drug resistance；resistance monitoring
大腸埃希菌寄居在人和动物的肠道内的正常菌群，也可以引起社区感染性疾病和医院感染性疾病。大肠埃希菌又称大肠杆菌，主要引起泌尿生殖道的感染，也可引起其他感染性疾病。大肠埃希菌最重要的耐药机制是产生超广谱β-内酰胺酶[1]。对于这种细菌临床上为重度感染首选碳青霉烯类抗生素进行治疗[2]。大肠埃希菌是医院感染的主要条件致病菌，因其多重耐药特性而引起广泛关注[3]。对大肠埃希菌进行长期动态的耐药性监测，指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。现就2013年某院大肠埃希菌的耐药监测结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 收集2013年1月1日至2013年12月31日的临床分离的大肠埃希菌，剔除同一患者相同部位的重复菌株，共817株，按《全国临检操作规程（第三版）》进行细菌鉴定及药敏试验。
1.2 方法 药敏试验采用VITEK-2全自动微生物鉴定药敏检测系统（法国生物梅里埃公司）进行。抗菌药物品种见本文结果部分，全自动药敏试验卡片为VITEK-2检测系统配套产品（法国生物梅里埃公司）。
1.3 统计学分析 药敏试验采用自动化仪器微量肉汤稀释法进行。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922和ATCC35218。每周进行1次质控，药敏试验结果按CLSI2012年版标准判读。统计分析数据采用WHONET5.6软件统计分析。
2 结 果
2.1 每月分离细菌分布图 见图1。
2.2 大肠埃希菌耐药性分析 见表1。
3 讨 论
大肠埃希菌是埃希菌属（Escherichia）最为常见的菌种，是本菌属模式种，是肠道菌群中的重要代表种。大肠埃希菌为直短杆状革兰阴性杆菌，多数有周鞭毛，能运动，有菌毛。本菌兼性厌氧，营养要求不高，在血平板和普通平板上生长为圆形、湿润、灰白色菌落，在肠道选择性培养基上发酵乳糖产酸，依培养基指示剂不同而形成不同颜色的菌落，在麦康凯上为红色菌落。大肠埃希菌具有肠杆菌科所有的抗原结构。
大肠埃希菌的致病物质包括侵袭力和毒素。侵袭力与K抗原和菌毛密切相关，K抗原有抗吞噬及抵抗抗体和补体的作用；菌毛可粘附于宿主粘膜表面定值，继而侵犯宿主引起感染性疾病。内毒素能引起宿主发热。休克、弥漫性血管内溶血等病理生理反应。肠产毒性大肠埃希菌能产生不耐热肠毒素和耐热肠毒素，它们均可引起肠道细胞中cAMP水平的升高，肠液分泌增加而导致腹泻。 大肠埃希菌是临床感染中最常见的革兰阴性杆菌，也是医院感染常见病原菌，可引起人体各部位的感染，以尿路感染最为常见。该菌还可以引起菌血症、肺炎、新生儿脑膜炎、胆道感染、术后腹腔感染及伤口创面感染等。长与厌氧菌、粪肠球菌等菌混合感染，其脓液常有粪臭味。
大肠埃希菌对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂敏感，对青霉素、第1、2、3代头孢菌素及单环菌素耐药。其耐药性主要大肠埃希菌产生广谱β-内酰胺酶所致。ESBL包括TEM、SHV和非TEM、SHV型，由智力介导产生。ESBL是目前肠杆菌科细菌，尤其是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对广谱头孢菌素产生耐药性的最主要的原因[4]。
大肠杆菌的耐药机制分为天然耐药机制和获得性耐药机制。天然耐药也叫固有耐药，指的是细菌的耐药性的产生是细菌所固有的，与细菌的遗传和进化密切相关而不依赖于抗生素的存在[5]。固有性耐药机制主要包括基因突变引起的耐药基因的改变以及细胞膜药物泵出机制的产生。获得性耐药指的是细菌在抗生素选择性压力下引起基因突变。目前大肠埃希菌的耐药机制主要有5种；抗生素靶位的改变；酶对抗生素的修饰和破坏；主动外排机制的产生；细菌外膜通透性的改变[6]；质粒介导的耐药性[7]。
本研究提示大肠埃希菌对替加环素、亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率均大于97%；对呋喃妥因和头孢吡肟的敏感率均大于80%；对头孢西丁的敏感率为73.9；对阿莫西林/克拉维酸、氨曲南、妥布霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、头孢曲松、氨苄西林、头孢唑啉的敏感率均低于70%；ESBL菌株的检出率为42.1%。
本研究中ESBL的检出率为42.1%，可能是导致大腸埃希菌对青霉素及酶抑制剂、头孢菌素耐药的主要原因。其机制与耐药菌产生β-内酰胺酶密切相关。主要包括作用于青霉素的青霉素酶和主要作用于头孢菌素的头孢菌素没，以及作用于两者的中间类型。β-内酰胺酶可以水解该类药物的β-内酰胺环是酰胺键断裂而失去抗菌活性。如果针对性的研究头孢菌素的酶抑制剂，也许在一定程度上会对耐药菌产生作用。这也是为什么本研究中大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为97.0%。但是其具体的耐药机制以及分子流行病学的状况有待于进一步的研究。
近年来，随着抗生素在畜牧等养殖业中的大量应用，大量的抗生素不断进入水、土壤、河流等环境中[8]。使得大肠杆菌的耐药普不断扩大[9-13]，耐药水平不断提高，给我国居民的健康带来潜在危害[14]。因此除要规范临床的合理使用抗生素外，畜牧等养殖产业抗生素的合理使用也十分重要。
参考文献
[1] 方洁，何乐，何娟，倪语星.上海交通大学医学院附属瑞金医院大肠杆菌耐药率与抗菌药物使用强度8年的相关性分析[J].药学服务与研究，2013（02）：85-88.
[2] 谢刚，安昌勇，张才全，唐华.肠道抗生素行肠道准备后对大肠杆菌耐药的影响[J].中国临床药理学与治疗学，2013（04）：433-436.
[3] 郭邦成，闫立群，郝琼，等.宁夏致泻性大肠杆菌的流行特征及耐药现状研究[J].宁夏医学杂志，2013（04）：307-309.
[4] 李佩波.大肠埃希菌耐药及机制研究进展[J].西南军医，2011，13（1）：95-97.
[5] 赵晓丽，胡大春.大肠埃希菌耐药机制的研究进展[J].国际检验医学杂志，2007，28（5）：438-441.
[6] 李俐，蒋燕群.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌外膜蛋白与耐药机制的研究进展[J].上海交通大学学报（医学版），2010，30（11）：1433-1436.
[7] 赵庆英，刘德梦.大肠埃希菌耐药机制研究进展[J].国外医药：抗生素分册，2010，31（4）：190-S4.
[8] 崔艳艳，高洪，严玉霖，等.大肠埃希菌外膜蛋白F与细菌耐药性研究进展[J].动物医学进展，2013，34（6）：164-166.
[9] 牛玉娟，等.泰安及周边地区禽大肠杆菌分离鉴定及耐药分析[J].家禽科学，2013（12）：6-9.
[10] 陈燕杰，裴亚玲，吴华，等.鸭源大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因的检测与传播扩散机制[J].中国人兽共患病学报，2013（02）：138-141+147.
[11] 陈惠凤.动物园鸟类大肠杆菌耐药情况调查[J].中国畜禽种业，2013（06）：129-131.
[12] 贺志沛，王玲飞，刘建华，等.宠物犬源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR的检测及药物敏感性分析[J].中国畜牧兽医，2013（06）：211-215.
[13] 陈伟，张永正，汪雪雁，薛秀恒，涂健，祁克宗.动物源性大肠杆菌ESBLs类耐药基因与HPI基因的双重PCR检测及相关性分析[J].中国兽医科学，2013（08）：800-805.
[14] 刘淑芬，张敏.大肠埃希菌产ESBLs进展及耐药性调查[J].河北医药，2014（5）：783-784.