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【摘要】 目的 探讨叶酸对饮水型砷暴露小鼠脑中超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的影响。方法 随机抽取健康的雌性小鼠10只作为阴性对照组饮用蒸馏水，另外抽取30只饮用浓度为50mg/L的亚砷酸钠水，4周后将饮用含有亚砷酸钠水的小鼠分为3组，分别灌胃给予蒸馏水、1mg/kg.bw剂量的叶酸和5mg/kg.bw剂量的叶酸。2周后测定各组小鼠脑中的SOD、GSH和MDA含量。结果 与阴性对照组相比，MDA含量显著增加，差异具有统计学意义（P<0.05），GSH含量显著下降，差异具有统计学意义（P<0.05），SOD含量无明显改变（P>0.05）。SOD含量、MDA含量和GSH含量均无明显改变（P>0.05），两叶酸剂量组之间也均无明显不同（P>0.05）。结论 本实验条件下，叶酸对饮水型砷暴露小鼠脑部的质脂过氧化损伤无拮抗作用。
【关键词】 叶酸；砷；超氧化物歧化酶；谷胱甘肽；丙二醛
文章編号：1004-7484（2014）-06-3519-02
现有研究表明砷及其化合物对人群中枢神经系统可造成严重的损伤，其机制目前还不清楚。最近研究又表明叶酸可能从多方面预防和治疗脑神经的损伤。故本实验将探讨叶酸是否对砷暴露小鼠脑部损伤的有保护作用，为更好的预防治疗砷中毒给人类造成的脑部损伤提供科学的理论依据。
1 资料与方法
1.1 实验动物 20克左右雌性昆明小鼠40只，清洁级，由中国医科大学实验动物中心提供。
1.2 动物分组与染毒 小鼠适应性喂养一周后，随机抽取10只作为阴性对照组饮用蒸馏水，其余30只饮用含亚砷酸钠水，自由饮用，浓度为50mg/L。本实验中亚砷酸钠由E.Merck，Darmstadt公司生产，叶酸由上海江莱生物科技有限公司提供。
1.3 脑抗氧化指标检测 小鼠处死取出脑组织，用生理盐水制成10%的脑组织匀浆3000r/min离心5min后取上清液测定超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）及蛋白质。检测所需的试剂盒均为南京建成生物工程研究所提供，方法参照试剂盒说明。
1.4 统计分析 实验数据均以χ±s进行表示。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。各组间比较采用方差齐性检验和单因素方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结 果
与阴性对照组相比，MDA含量显著增加，差异具有统计学意义（P<0.05），GSH含量显著下降，差异具有统计学意义（P<0.05），SOD含量无明显改变（P>0.05）。与50mg/L亚砷酸钠+蒸馏水组相比，叶酸处理组的SOD含量、MDA含量和GSH含量均无明显改变（P>0.05），两叶酸剂量组之间也均无明显不同（P>0.05），见表1。
3 讨 论
氧化应激是砷中毒机制中的重要学说。活性三价砷（iAs3+）在体内外试验中都被证实可产生大量的活性氧和自由基，并引起血红素加氧酶的产生增加[1]。流行病学调查也显示高砷暴露人群血中活性氧水平显著升高，抗氧化物质水平显著下降，并可能存在剂量反应关系[2]。现研究已表明砷对神经系统的损伤机制可能也是影响脑的抗氧化能力，如姚芹[3]报道了亚砷酸钠亚慢性暴露可使小鼠肝脏和大脑组织脂质过氧化水平增强，抗氧化能力降低。本次实验的研究结果也表明砷能降低脑中的抗氧化能力，破坏机体氧化与抗氧化系统之间的动态平衡，发生氧化应激，引起自由基的大量堆积。叶酸是由蝶啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸结合而成，在体内是以辅酶的形式参与体内物质代谢，而这些物质代谢又与神经系统发育和功能密切相关[4]。最近的研究表明叶酸可能通过抗氧化作用来保护中枢神经系统。通过体外实验研究了叶酸与N3、SO4、OH、O等自由基反应过程，证明叶酸通过与自由基的竞争结合，可清除体内自由基，防止自由基对生物的损害，并指出叶酸抗氧化功能的基础是C4位上的OH基团，结果表明叶酸具有明显的抗氧化功能。本次实验通过叶酸处理后，饮水型砷暴露小鼠脑中抗氧化指标并没有发生明显的改变，叶酸并没有拮抗砷造成的小鼠脑部脂质过氧化损伤。本次实验采用了两个叶酸剂量，两个剂量下都没有明显不同，说明并不是剂量导致叶酸没有起到很好的抗氧化作用，但本次实验干预时间只有2周，这可能是影响叶酸对砷造成的小鼠脑部脂质过氧化损伤无拮抗作用最大因素，所以叶酸对砷导致的脑部损伤的抗氧化作用可能尚需进一步研究证实。
参考文献
[1] 孔席丽，郑玉建，张杰，等.慢性砷中毒的脂质过氧化机制研究进展[J].地方病通报，2007，22（3）：62-64.
[2] 熊传龙，张秀丽，蔡生花，等.高砷水对机体氧化与抗氧化能力的影响[J].中国地方病学杂志，2004，23（4）：79-80.
[3] 姚芹，吴顺华，郑玉建，等.亚砷酸钠亚慢性染毒对小鼠肝和脑组织抗氧化水平的影响[J].环境与健康杂志，2009，26（5）：401-403.
[4] 张碧玫，崔忠友，万钧，等.叶酸在多系统疾病中的应用[J].中国医院用药评价与分析，2007，7（6）：416-418.
【关键词】 叶酸；砷；超氧化物歧化酶；谷胱甘肽；丙二醛
文章編号：1004-7484（2014）-06-3519-02
现有研究表明砷及其化合物对人群中枢神经系统可造成严重的损伤，其机制目前还不清楚。最近研究又表明叶酸可能从多方面预防和治疗脑神经的损伤。故本实验将探讨叶酸是否对砷暴露小鼠脑部损伤的有保护作用，为更好的预防治疗砷中毒给人类造成的脑部损伤提供科学的理论依据。
1 资料与方法
1.1 实验动物 20克左右雌性昆明小鼠40只，清洁级，由中国医科大学实验动物中心提供。
1.2 动物分组与染毒 小鼠适应性喂养一周后，随机抽取10只作为阴性对照组饮用蒸馏水，其余30只饮用含亚砷酸钠水，自由饮用，浓度为50mg/L。本实验中亚砷酸钠由E.Merck，Darmstadt公司生产，叶酸由上海江莱生物科技有限公司提供。
1.3 脑抗氧化指标检测 小鼠处死取出脑组织，用生理盐水制成10%的脑组织匀浆3000r/min离心5min后取上清液测定超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）及蛋白质。检测所需的试剂盒均为南京建成生物工程研究所提供，方法参照试剂盒说明。
1.4 统计分析 实验数据均以χ±s进行表示。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。各组间比较采用方差齐性检验和单因素方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结 果
与阴性对照组相比，MDA含量显著增加，差异具有统计学意义（P<0.05），GSH含量显著下降，差异具有统计学意义（P<0.05），SOD含量无明显改变（P>0.05）。与50mg/L亚砷酸钠+蒸馏水组相比，叶酸处理组的SOD含量、MDA含量和GSH含量均无明显改变（P>0.05），两叶酸剂量组之间也均无明显不同（P>0.05），见表1。
3 讨 论
氧化应激是砷中毒机制中的重要学说。活性三价砷（iAs3+）在体内外试验中都被证实可产生大量的活性氧和自由基，并引起血红素加氧酶的产生增加[1]。流行病学调查也显示高砷暴露人群血中活性氧水平显著升高，抗氧化物质水平显著下降，并可能存在剂量反应关系[2]。现研究已表明砷对神经系统的损伤机制可能也是影响脑的抗氧化能力，如姚芹[3]报道了亚砷酸钠亚慢性暴露可使小鼠肝脏和大脑组织脂质过氧化水平增强，抗氧化能力降低。本次实验的研究结果也表明砷能降低脑中的抗氧化能力，破坏机体氧化与抗氧化系统之间的动态平衡，发生氧化应激，引起自由基的大量堆积。叶酸是由蝶啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸结合而成，在体内是以辅酶的形式参与体内物质代谢，而这些物质代谢又与神经系统发育和功能密切相关[4]。最近的研究表明叶酸可能通过抗氧化作用来保护中枢神经系统。通过体外实验研究了叶酸与N3、SO4、OH、O等自由基反应过程，证明叶酸通过与自由基的竞争结合，可清除体内自由基，防止自由基对生物的损害，并指出叶酸抗氧化功能的基础是C4位上的OH基团，结果表明叶酸具有明显的抗氧化功能。本次实验通过叶酸处理后，饮水型砷暴露小鼠脑中抗氧化指标并没有发生明显的改变，叶酸并没有拮抗砷造成的小鼠脑部脂质过氧化损伤。本次实验采用了两个叶酸剂量，两个剂量下都没有明显不同，说明并不是剂量导致叶酸没有起到很好的抗氧化作用，但本次实验干预时间只有2周，这可能是影响叶酸对砷造成的小鼠脑部脂质过氧化损伤无拮抗作用最大因素，所以叶酸对砷导致的脑部损伤的抗氧化作用可能尚需进一步研究证实。
参考文献
[1] 孔席丽，郑玉建，张杰，等.慢性砷中毒的脂质过氧化机制研究进展[J].地方病通报，2007，22（3）：62-64.
[2] 熊传龙，张秀丽，蔡生花，等.高砷水对机体氧化与抗氧化能力的影响[J].中国地方病学杂志，2004，23（4）：79-80.
[3] 姚芹，吴顺华，郑玉建，等.亚砷酸钠亚慢性染毒对小鼠肝和脑组织抗氧化水平的影响[J].环境与健康杂志，2009，26（5）：401-403.
[4] 张碧玫，崔忠友，万钧，等.叶酸在多系统疾病中的应用[J].中国医院用药评价与分析，2007，7（6）：416-418.