PD-L1蛋白的表达、纯化与鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：matrx1007999999

【摘要】

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目的克隆人PD-L1的基因,纯化Flp-In CHO系统表达PD-L1蛋白.方法用RT-PCR方法制备PD-L1基因,以哺乳细胞高效表达质粒载体pSec/WG为载体构建重组PD-L1/pSec/WG质粒,重组体用载

【作者】

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毛丽伟倪兵姜曼黎万玲肖宇吴玉章

【机构】

：

第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2005年5期

【关键词】

：

PD-L1 RT-PCR 克隆 programmed death-1 RT-PCR clone

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目的克隆人PD-L1的基因,纯化Flp-In CHO系统表达PD-L1蛋白.方法用RT-PCR方法制备PD-L1基因,以哺乳细胞高效表达质粒载体pSec/WG为载体构建重组PD-L1/pSec/WG质粒,重组体用载体上的通用引物为测序引物,鉴定克隆的正确性.再将鉴定过的重组质粒用脂质体法转化转染Flp-In CHO细胞收集上清,G蛋白亲和层析法纯化蛋白.用免疫印迹法鉴定转化细胞所分泌上清的PD-L1基因的表达.结果正确构建了PD-L1/pSec/WG重组质粒,并且在转化细胞所分泌的上清中检测出了PD-L1

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