缺氧条件下环磷酸腺苷对肠黏膜屏障功能的调控研究

来源 :中华胃肠外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:diyidixie00
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目的 探讨缺氧条件下环磷酸腺苷(cAMP)水平的变化对肠黏膜屏障功能的影响.方法 采用人结肠癌Caco-2细胞建立肠上皮细胞缺氧模型,分为常氧组、常氧加Forskolin组、缺氧8h组和缺氧8h加SQ22536(腺苷酸环化酶抑制剂)组.采用cAMP检测试剂盒,检测实验各组cAMP水平的变化;RT-PCR及Western blot方法分别检测各组肠上皮紧密连接蛋白claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达水平的变化;Millipore电阻抗系统法检测各组肠上皮细胞跨上皮电阻(TER)的变化情况.结果 缺氧8h组肠上皮cAMP含量较常氧组明显升高[(6.30±0.50) pmol/L比(2.38±0.18) pmoL/L,P<0.01],而claudin-1和occludin的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(均P<0.05),TER值下降了6.30±0.64 (P<0.01).与缺氧8h组相比,缺氧8h加SQ22536组肠上皮cAMP含量明显降低[(2.12±0.23) pmol/L比(6.30±0.50) pmol/L,P<0.01],claudin-1和occludin mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01),TER值升高了32.96±2.16(均P<0.05).结论 缺氧条件下cAMP水平升高,而下调cAMP水平可增加肠道紧密连接蛋白claudin-1及occludin mRNA及蛋白水平的表达,从而减轻缺氧对肠上皮屏障的损伤。

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