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以基因组DNA为模板,利用PCR技术从弗氏柠檬酸细菌( Citrobacter freundii )中扩增得到含有酪氨酸酚解酶基因的DNA片段,定向连接到质粒pUC118上,得到重组质粒pTPL,将此重组质粒转化到受体菌E.coli XL-1-Blue MRF'中,通过蓝白斑鉴定挑出阳性菌株.从此阳性菌株中提取质粒pTPL并将此质粒转入到E.coli JM109中,用E.coli JM109(pTPL)制备高活性的酪氨酸酚解酶.对质粒稳定性的研究表明,E.coli JM109(pTPL)在无选择压力下37