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【摘要】死亡相关蛋白激酶（DAPK）是近年来发现的一种抑癌基因，具有参与细胞凋亡、细胞迁移等生物学功能。国内外研究报道证实DAPK基因启动子甲基化表达水平与肿瘤的发生发展及治疗有密切关系。对DAPK结构，功能及其甲基化机制研究的深入和完善，必将对肿瘤的靶向治疗提供更多的选择药物和治疗方式。
【关键词】DAPK；肿瘤；甲基化；治疗
1概述
死亡相关蛋白激酶（death associated protein，DAPK）是一类多基序的钙调素调控的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，它能够使其底物蛋白的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化，是一种调节细胞凋亡的正调控因子。DAPK在各种组织中广泛表达，参与内源性和外源性凋亡通路，是凋亡的正性调节因子，DAPK基因在正常组织中均有表达，在肝癌、肺癌及膀胱癌等肿瘤中呈低表达或缺失状态。近年的研究发现，DAPK基因启动子甲基化的异常与临床很多肿瘤疾病有关，这一发现可能为临床肿瘤相关疾病的诊断和临床术后评估提供有益的线索。
2DAPK基因启动子区CpG岛高甲基化与癌症关系的研究
2.1胃癌是世界上较常见的恶性肿瘤之一，胃癌的发生、发展与多种肿瘤抑制基因和肿瘤相关基因的失活有关。目前研究发现，胃癌患者肿瘤组织中p16及其外周血浆中DAPK基因出现异常甲基化，这提示DAPK基因启动子区的高甲基化可能作为评估胃癌组织分化程度和淋巴结转移程度的参考指标之一，同时胃癌病人血浆DAPK基因异常甲基化检测可能为探索筛选胃癌患者新的标志物提供新思路[1]。
2.2宫颈癌是全球妇女中仅次于乳腺癌和结直肠癌的第3个常见的恶性肿瘤，是最常见的女性生殖道恶性肿瘤。宫颈癌是目前唯一一个病因明确的妇科恶性肿瘤，与高危型人乳头瘤病毒（human papillomaviruses，HPV）的持续感染相关。有研究表明在正常宫颈组织中DAPK则不存在甲基化，而在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中DAPK启动子CpG岛的甲基化率逐渐增高，这一研究提示DAPK基因可能导致或促进了宫颈癌的发生，而且高危型HPV感染率随宫颈病变级别的增高而递增，说明高危型HPV感染和宫颈癌的发生密切相关。DAPK的甲基化促进肿瘤产生的机制可能是启动子甲基化造成基因失活、蛋白表达缺失，而且DAPK的甲基化过程可能是在DNMT1的催化作用下完成的[2]。
2.3肺癌是肺部最常見的恶性肿瘤。世界卫生组织调查报告，许多国家和地区，肺癌的发病率占恶性肿瘤的首位。早期研究表明DAPK1基因的过表达可以在一定程度上逆转PGCl3细胞的恶性表型，使PGCl3细胞生长受抑制，体外侵袭、运动和粘附能力下降，抑制非小细胞肺癌转移的可能原因。近期研究发现，在健康人中未检出DAPK基因启动子的甲基化，而在部分非小细胞肺癌患者中检出，DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌的发生有关。DAPK基因启动子的甲基化与非小细胞肺癌的淋巴结转移和临床分期有相关性，其有可能作为评估非小细胞肺癌分期的分子生物学指标[3]。
2.4肝癌是指发生于肝脏的恶性肿瘤，原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，根据最新统计，全世界每年新发肝癌患者约六十万，居恶性肿瘤的第五位。原发性肝癌按细胞分型可分为肝细胞型肝癌、胆管细胞型肝癌及混合型肝癌。肝癌细胞DAPK基因mRNA表达失活与该基因的启动子区域高甲基化有关。5-Aza-CdR可以通过逆转肝癌细胞SMMC-7721DAPK基因启动子区域高甲基化状态来恢复其mRNA表达，从而恢复肿瘤抑制功能[4]。
3展望
总之，DAPK基因启动子甲基化与肿瘤相关疾病的关系非常密切，由于DNA甲基化是一个可逆的过程，所以我们可以通过一些特殊因素使DNA脱甲基化和沉默基因再活化，这是治疗癌症的理想方法。临床上现已批准使用的用来治疗癌症的去甲基化的药物有5-氮杂胞苷和5-杂氮-2-脱氧胞苷酸。此外1-（β-呋核亚硝脲）-1，2-双氢奎尼丁也已经证实能使膀胱癌肿瘤体积缩小[5]。目前去甲基化药物的一个重要的缺点就是它们不能靶向治疗某种特定的基因，只能广泛地去甲基化许多基因，而且有些药物因不能口服而导致临床用药受到限制，因此我们还需要大量的研究来寻找长期有效的能再活化那些未能正常表达的基因。以后对DAPK结构、功能及其甲基化机制研究的深入和完善，必将对肿瘤的靶向治疗提供更多的选择药物和治疗方式。
参考文献
[1]肖述兵，万金龙，彭碧华，等.胃癌中DAPK1表达及其与临床病理因素的相关性研究[J].国际检验医学杂志：2012，33（12）：1434-1437.
[2]花敏慧，刘春花，张玉泉.宫颈癌中DAPKⅠ、RAR 甲基化与高危型HPV感染的相关研究[J].南通大学学报医学版：2011，31（2）：134-137.
[3]彭再梅，山长婷，王惠芳，等.诱导痰RASSF1A，p16和 DAPK基因启动子区甲基化在肺癌诊断中的价值[J].中南大学学报：医学版，2010，35（3）：247-253.
[4]谢海，仇小强，余红平，等.5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人肝癌细胞株SMMC-7721 增殖及DAPK mRNA表达的影响[J].广西医科大学学报，2012，29：13-16.
[5]Tab erlay PC，J on es PA.DNA methyl at ion and cancer[J].Prog Drug Res，2011，67：1-23.
【关键词】DAPK；肿瘤；甲基化；治疗
1概述
死亡相关蛋白激酶（death associated protein，DAPK）是一类多基序的钙调素调控的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，它能够使其底物蛋白的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化，是一种调节细胞凋亡的正调控因子。DAPK在各种组织中广泛表达，参与内源性和外源性凋亡通路，是凋亡的正性调节因子，DAPK基因在正常组织中均有表达，在肝癌、肺癌及膀胱癌等肿瘤中呈低表达或缺失状态。近年的研究发现，DAPK基因启动子甲基化的异常与临床很多肿瘤疾病有关，这一发现可能为临床肿瘤相关疾病的诊断和临床术后评估提供有益的线索。
2DAPK基因启动子区CpG岛高甲基化与癌症关系的研究
2.1胃癌是世界上较常见的恶性肿瘤之一，胃癌的发生、发展与多种肿瘤抑制基因和肿瘤相关基因的失活有关。目前研究发现，胃癌患者肿瘤组织中p16及其外周血浆中DAPK基因出现异常甲基化，这提示DAPK基因启动子区的高甲基化可能作为评估胃癌组织分化程度和淋巴结转移程度的参考指标之一，同时胃癌病人血浆DAPK基因异常甲基化检测可能为探索筛选胃癌患者新的标志物提供新思路[1]。
2.2宫颈癌是全球妇女中仅次于乳腺癌和结直肠癌的第3个常见的恶性肿瘤，是最常见的女性生殖道恶性肿瘤。宫颈癌是目前唯一一个病因明确的妇科恶性肿瘤，与高危型人乳头瘤病毒（human papillomaviruses，HPV）的持续感染相关。有研究表明在正常宫颈组织中DAPK则不存在甲基化，而在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中DAPK启动子CpG岛的甲基化率逐渐增高，这一研究提示DAPK基因可能导致或促进了宫颈癌的发生，而且高危型HPV感染率随宫颈病变级别的增高而递增，说明高危型HPV感染和宫颈癌的发生密切相关。DAPK的甲基化促进肿瘤产生的机制可能是启动子甲基化造成基因失活、蛋白表达缺失，而且DAPK的甲基化过程可能是在DNMT1的催化作用下完成的[2]。
2.3肺癌是肺部最常見的恶性肿瘤。世界卫生组织调查报告，许多国家和地区，肺癌的发病率占恶性肿瘤的首位。早期研究表明DAPK1基因的过表达可以在一定程度上逆转PGCl3细胞的恶性表型，使PGCl3细胞生长受抑制，体外侵袭、运动和粘附能力下降，抑制非小细胞肺癌转移的可能原因。近期研究发现，在健康人中未检出DAPK基因启动子的甲基化，而在部分非小细胞肺癌患者中检出，DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌的发生有关。DAPK基因启动子的甲基化与非小细胞肺癌的淋巴结转移和临床分期有相关性，其有可能作为评估非小细胞肺癌分期的分子生物学指标[3]。
2.4肝癌是指发生于肝脏的恶性肿瘤，原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，根据最新统计，全世界每年新发肝癌患者约六十万，居恶性肿瘤的第五位。原发性肝癌按细胞分型可分为肝细胞型肝癌、胆管细胞型肝癌及混合型肝癌。肝癌细胞DAPK基因mRNA表达失活与该基因的启动子区域高甲基化有关。5-Aza-CdR可以通过逆转肝癌细胞SMMC-7721DAPK基因启动子区域高甲基化状态来恢复其mRNA表达，从而恢复肿瘤抑制功能[4]。
3展望
总之，DAPK基因启动子甲基化与肿瘤相关疾病的关系非常密切，由于DNA甲基化是一个可逆的过程，所以我们可以通过一些特殊因素使DNA脱甲基化和沉默基因再活化，这是治疗癌症的理想方法。临床上现已批准使用的用来治疗癌症的去甲基化的药物有5-氮杂胞苷和5-杂氮-2-脱氧胞苷酸。此外1-（β-呋核亚硝脲）-1，2-双氢奎尼丁也已经证实能使膀胱癌肿瘤体积缩小[5]。目前去甲基化药物的一个重要的缺点就是它们不能靶向治疗某种特定的基因，只能广泛地去甲基化许多基因，而且有些药物因不能口服而导致临床用药受到限制，因此我们还需要大量的研究来寻找长期有效的能再活化那些未能正常表达的基因。以后对DAPK结构、功能及其甲基化机制研究的深入和完善，必将对肿瘤的靶向治疗提供更多的选择药物和治疗方式。
参考文献
[1]肖述兵，万金龙，彭碧华，等.胃癌中DAPK1表达及其与临床病理因素的相关性研究[J].国际检验医学杂志：2012，33（12）：1434-1437.
[2]花敏慧，刘春花，张玉泉.宫颈癌中DAPKⅠ、RAR 甲基化与高危型HPV感染的相关研究[J].南通大学学报医学版：2011，31（2）：134-137.
[3]彭再梅，山长婷，王惠芳，等.诱导痰RASSF1A，p16和 DAPK基因启动子区甲基化在肺癌诊断中的价值[J].中南大学学报：医学版，2010，35（3）：247-253.
[4]谢海，仇小强，余红平，等.5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人肝癌细胞株SMMC-7721 增殖及DAPK mRNA表达的影响[J].广西医科大学学报，2012，29：13-16.
[5]Tab erlay PC，J on es PA.DNA methyl at ion and cancer[J].Prog Drug Res，2011，67：1-23.