小发夹RNA抑制Nogo基因表达促进脊髓损伤修复的实验研究

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目的 利用RNA干涉(RNAi)技术使特定的基因(Nogo)沉默,探索脊髓损伤的治疗方法.方法 设计有小发夹结构的两条DNA序列,PCR扩增带有U6启动子的小发夹,腺病毒包装重组体,转染少突胶质细胞,采用Western blot法分析Nogo-66的蛋白表达水平.结果 成功地构建了靶向Nogo基因RNAi的带有U6启动子的小发夹重组体,Nogo-66蛋白表达水平明显下降.结论 靶向RNAi小发夹重组体经腺病毒包装后,成功转染少突胶质细胞并能有效抑制Nogo-66基因的表达.
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