【摘 要】
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目的制备抗溶组织内阿米巴滋养体表面抗原的重组人单克隆抗体Fab段.方法提取无症状溶组织内阿米巴包囊携带者外周血淋巴细胞,分离总RNA,行逆转录聚合酶链反应扩增IgG轻链和重
【机 构】
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复旦大学上海医学院病原生物系,Tokai
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目的制备抗溶组织内阿米巴滋养体表面抗原的重组人单克隆抗体Fab段.方法提取无症状溶组织内阿米巴包囊携带者外周血淋巴细胞,分离总RNA,行逆转录聚合酶链反应扩增IgG轻链和重链Fd片段,并与原核表达质粒连接,转化大肠埃希菌构建抗体库.通过抗原夹心膜法、间接荧光抗体试验等方法,筛选特异性表达抗溶组织内阿米巴滋养体表面抗原的重组人单克隆抗体Fab段的克隆,并纯化其表达产物.结果共筛选3×104个克隆,其中一个克隆表达的Fab段识别的抗原表位位于滋养体表面.结论运用原核表达系统可制备抗溶组织内阿米巴重组人单克隆抗体Fab段,在临床诊断和治疗上均有应用前景.
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