研究雷公藤甲素（triptolide,TP）诱导卵巢颗粒细胞（ovarian granulosa cells,OGCs）自噬所需的浓度、时间及对PI3K/AKT/mTOR通路的影响。采用CCK-8法比较不同浓度的TP对原代培养大鼠OGCs的抑制作用并计算IC₅₀;Western blot法检测不同浓度、时间点下TP对OGCs自噬相关因子蛋白表达,同时检测TP、自噬诱导剂（brefeldin A）、PI3K/mTOR抑制剂（NVP-BEZ235）分别干预OGCs对PI3K/AKT/mTOR通路及自噬相关因子蛋白表达的影响。结果显示,不同浓度TP作用于大鼠OGCs的IC₅₀为14.65μmol·L^-1,其中最小抑制浓度为0.1μmol·L^-1(100 nmol·L^-1);与空白对照组相比,各组Beclin1,LC3Ⅱ蛋白表达水平均升高,LC3Ⅰ及p62蛋白表达水平均下降,其中100 nmol·L^-1TP作用于大鼠OGCs 12 h,各指标变化显著（P<0.05或P<0.01）;TP,brefeldin A,NVP-BEZ235分别处理大鼠OGCs 12h后,与空白对照组相比,TP可显著促进下游自噬效应分子Beclin1,LC3Ⅱ蛋白表达水平并抑制LC3Ⅰ,p62蛋白表达水平（P<0.05或P<0.01）,且TP组Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达高于brefeldin A组,p62的表达低于brefeldin A组（P<0.05或P<0.01）。同时,TP能显著抑制p-PI3K,p-AKT,p-mTOR蛋白表达水平,且TP抑制效果优于NVP-BEZ235组。因此,该研究提示100 nmol·L^-1TP作用于离体培养大鼠OGCs 12 h,可成功诱导OGCs自噬;TP可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导OGCs自噬。