【摘 要】
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目的:提取分离短梗五加多糖组分，并体外评价其生物活性。方法:水提醇沉法提取短梗五加粗多糖（ASP）,离子交换色谱柱（DEAE-52）分离，苯酚-硫酸法、间羟基联苯法、考马斯亮蓝法测定其总糖、糖醛酸、蛋白质含量，高效液相色谱法（HPLC）分析单糖组成。噻唑蓝比色法（MTT）检测淋巴细胞的增殖，中性红比色法检测巨噬细胞的吞噬，硝酸还原酶法（Griess）和酶联免疫法（ELISA）检测一氧化氮（NO）释
【基金项目】
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吉林省科技发展项目（编号：20190304018YY）；
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目的:提取分离短梗五加多糖组分，并体外评价其生物活性。方法:水提醇沉法提取短梗五加粗多糖（ASP）,离子交换色谱柱（DEAE-52）分离，苯酚-硫酸法、间羟基联苯法、考马斯亮蓝法测定其总糖、糖醛酸、蛋白质含量，高效液相色谱法（HPLC）分析单糖组成。噻唑蓝比色法（MTT）检测淋巴细胞的增殖，中性红比色法检测巨噬细胞的吞噬，硝酸还原酶法（Griess）和酶联免疫法（ELISA）检测一氧化氮（NO）释放和肿瘤坏死因子α（TNF-α）分泌，以评价其免疫调节作用；采用心肌细胞（H9c2）缺氧复氧（H/R）损伤模型，评估其对H9c2细胞H/R损伤的保护作用及机制。结果:ASP经分离得到中性多糖（ASP-Ⅰ,由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成，摩尔比为1∶6.63∶2.72∶0.88）和酸性多糖（ASP-Ⅱ,由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成，摩尔比为1∶2.28∶4.30∶1.18∶2.82∶2.81）。ASP-Ⅰ和ASP-Ⅱ的总糖、糖醛酸、蛋白质含量分数分别为87.61%,0,0.82%和72.33%,19.71%,0.36%。与空白对照组、刀豆蛋白（ConA）组、脂多糖（LPS）组相比，短梗五加多糖50μg/mL～200μg/mL各组可单独及协同ConA、LPS促进淋巴细胞的增殖。与空白对照组相比，短梗五加多糖50μg/mL～200μg/mL各组可促进淋巴细胞的增殖、增强巨噬细胞的吞噬，促进NO的释放和TNF-α的分泌。与模型对照组相比，短梗五加多糖50μg/mL～100μg/mL各组可抑制H9c2细胞H/R损伤模型中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CK）活力、丙二醛（MDA）含量、半胱氨酸蛋白酶3（Caspase 3）蛋白表达的升高，促进超氧化物歧化酶（SOD）活力升高；上调微小RNA 451（micro RNA 451）表达，下调高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达。结论:短梗五加多糖具有免疫调节及保护H9c2细胞H/R损伤的作用，H9c2细胞H/R损伤与micro RNA 451/HMBG1表达有关。
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