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【摘要】 目的：了解雄激素受体（AR）在雄性激素源性脱发（AGA）患者顶部表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺中的表达情况。方法：选取26例雄性激素源性脱发患者顶部、枕部以及10例非脱发者的顶部头皮标本，用免疫组织化学检测表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺中AR的表达。结果：脱发患者头顶部毛囊、皮脂腺、汗腺AR表达均明显强于枕部和非脱发者枕部，差异均有统计学意义（P<0.05）；脱发患者枕部毛囊、皮脂腺、汗腺AR表达与非脱发者顶部AR表达比较差异均无统计学意义（P>0.05）；所有标本表皮中AR均为阴性。结论：AR在AGA患者头顶部毛囊、皮脂腺、汗腺的高表达，可能是AGA重要原因之一。
【关键词】 雄性激素受体； 雄性激素源性脱发
【Abstract】 Objective：To investigate AR expression in the top of epidermis， hair follicle and sebaceous gland， sudoriferous gland.Method：The top and the occipital scalp of AGA patients （n=26） and the top scalp of non-alopecia people （n=10） as specimens were obtained， and AR expressions in the epidermis， hair follicle and sebaceous gland， sudoriferous gland were studied by immunohistochemistry method.Result：AR expressions of hair follicle， sebaceous gland， sudoriferous gland on the top of AGA patients were stronger than the occipital of AGA patients and the top of non-alopecia（P<0.05）； AR expressions of hair follicle， sebaceous gland， sudoriferous gland in the occipital of AGA patients had no significant difference with the top of non-alopecia（P>0.05）. All samples were negative for AR in epidermis.Conclusion：AR expressions on the top of hair follicle and sebaceous gland， sudoriferous gland in AGA patients may be one of the key factors leading to AGA.
【Key words】 Androgen receptor； Androgenetic alopecia
First-author’s address：The First People’s Hospital of Jiujiang City，Jiujiang 332000，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.18.020
雄性激素源性脱发（Androgenetic alopecia，AGA）是临床最常见的脱发性疾病，表现为前额发际逐渐后退，顶部头发逐渐稀疏脱落。脱发不仅严重影响患者的外在形象，而且从心理上也给患者带来了无尽的烦恼，越来越受到人们的重视[1]。国内流行病学调查显示，本病在我国男性的患病率为15.73%～19.75%，女性患病率为2.73%～4.69%，其病因还不完全清楚，治疗也一直是个棘手的问题[2-3]。为探索AGA的发病原因，从而为防治提供依据，笔者对26例雄性激素源性脱发患者顶部和枕部头皮以及10例非脱发者顶部头皮标本，采用免疫组化法检测雄性激素受体（androgen receptor，AR）在表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺的表达水平，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2013年1月-2014年1月本院皮肤科门诊就诊的AGA患者26例，均为男性，年龄2l～49岁，平均（30.38±2.25）岁，病程3个月～3年。选取本院神经外科手术的非脱发患者，共10例，均为男性；年龄20～48岁，平均（29.83±1.69）岁。两组研究对象的性别、年龄比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经本院伦理委员会通过。
1.2 入选和排除标准 入选的AGA患者均具有典型临床症状，符合AGA诊断标准[4]。排除标准：（1）近半年内系统或局部使用过抗脱发药物；（2）头皮有细菌、真菌等感染性疾病。（3）伴严重心、肝、肾病、糖尿病及肿瘤等疾病者。
1.3 取材部位及方法 取AGA患者枕部和顶部皮肤标本，每块标本约2 mm×2 mm×6 mm大小，甲醛固定，深低温下保存，以备检测。非脱发者顶部头皮取自本院神经外科手术的非脱发患者废弃顶部皮肤标本。
1.4 试剂 鼠单克隆抗人AR抗体购自上海长嘉生物工程有限公司；免疫组织化学染色二步法的试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
1.5 检测方法 采取免疫组化化学二步法检测AR在AGA患者顶部、枕部和非脱发者顶部表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺的表达，具体操作步骤按照鼠单克隆抗人AR抗体和免疫组织化学二步法的试剂盒说明书操作。
1.6 结果判定 AR定位在细胞核[5]。染色结果标准参考半定量积分法：在光学显微镜下见细胞核出现棕黄色或棕褐色为阳性细胞[6]。根据阳性细胞平均百分比进行评分（A）：<10%计0分，10%～25%计1分，25%～50%计2分，>50%计3分。染色程度评分（B）：无着色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分。A+B得分0～2分者为阴性表达，3～6分者为阳性表达。 1.7 统计学处理 采用SPSS 15.0统计学软件对数据进行分析，计数资料比较采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
所有标本中表皮AR表达均为阴性。26例AGA患者中20例顶部毛囊AR表达阳性，表达率76.92%，5例枕部毛囊AR阳性，表达率19.23%，10例非脱发者顶部毛囊AR表达阳性2例，表达率20.00%，三组标本间毛囊AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=20.29，P<0.05）。AGA患者顶部毛囊AR表达与枕部毛囊AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=15.10，P<0.05），与非脱发者顶部毛囊AR表达比较差异有统计学意义（字2=7.60，P<0.05）。AGA患者枕部毛囊AR表达与非脱发者顶部毛囊AR表达比较差异无统计学意义（字2=0.17，P>0.05）。
26例AGA患者中有21例顶部皮脂腺、汗腺AR表达阳性，表达率均为80.77%；5例枕部皮脂腺、汗腺AR阳性，表达率19.23%。10例非脱发者顶部皮脂腺、汗腺AR表达阳性2例，表达率20.00%，三组标本间皮脂腺、汗腺AR表达有显著差异（ 字2=22.93，P<0.05）。AGA患者顶部皮脂腺、汗腺AR表达与枕部皮脂腺、汗腺AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=17.31，P<0.05），与非脱发者顶部皮脂腺、汗腺AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=9.08，P<0.05）。AGA患者枕部皮脂腺、汗腺AR表达与非脱发者顶部皮脂腺、汗腺AR表达比较差异无统计学意义（ 字2=0.17，P>0.05）。
3 讨论
AGA的病因及发病机制尚未完全明了。谭凤明等[7]报道67.57%的AGA患者有家族遗传史，遗传在雄激素性脱发的发病过程中起重要作用，一般认为是常染色体显性遗传[8]。近几年研究有了一定进展，特别是对于AR基因研究，AR基因位于Xq11.2-q12，长约90 kb，是第一个发现的与雄激素脱发发生相关的基因，也是迄今为止唯一经鉴定的雄激素脱发危险基因[9]。有报道AR基因可发生缺失、剪接位点突变等改变，致靶器官对睾丸或双氢睾酮无应答[10]。AR是甾体激素受体超家族的一员，作为雄激素诱导的转录因子介导雄激素在体内的活动[11]。雄激素为固醇类化合物，男性主要来自睾丸，少量由肾上腺皮质合成；女性主要由肾上腺皮质合成，卵巢也分泌少量。睾酮是人体分泌的主要雄激素，它在体内经5α-还原酶作用可转化为活性更高的二氢睾酮（DHT），后者与其受体结合形成雄激素-受体复合物后进入细胞核，在核内控制毛发生长基因的表达，使头发的生长期缩短，头皮毛囊逐渐萎缩、微小化，终毛转变为毳毛，最终引起脱发。
笔者用免疫组化方法对毛囊中的AR受体进行检测，患者头顶部AR表达明显强于枕部和非脱发者顶部（P<0.05），并且毛囊上皮细胞中几乎没有AR受体，而AR受体存在于属真皮细胞的毛乳头细胞上，提示毛乳头是毛囊中雄激素作用的主要靶点，这与Inui等[12]用反转录聚合酶反应（RT-PCR）的方法发现AGA脱发患者局部皮肤乳头雄性激素受体比健康人高是一致的。毛乳头细胞是一种具有广泛生物学特性和功能的细胞，具有在体内外条件下重建毛囊的功能，其功能的异常变化是导致毛囊周期失衡和脱发现象的主要起始因素[13]。毛乳头细胞中的AR受体可能与睾酮、二氢睾酮结合后导致转化生长因子（TGF-β）与胰岛素生长因子（IGF-1）转录水平的变化，还可能使毛乳头细胞自分泌抑制因子，导致头皮毛囊微型化成毳毛毛囊，最后引起脱发[14-15]。雄激素通过AR所介导的细胞效应还不十分清楚，需要进一步全面深入研究。
笔者还发现AGA患者头顶部皮脂腺、汗腺AR表达较强，与枕部和非脱发者顶部AR表达比较差异有统计学意义（P<0.05），而表皮细胞中几乎没有AR表达，笔者推测AR头顶部皮脂腺、汗腺中高表达，在AGA过程中也起着一定作用。有研究发现小鼠触须毛囊上1/3切除后可促进毛囊生长，这可能是因为切除部分包括皮脂腺，皮脂腺对毛发生长有抑制作用[16]。皮脂腺、汗腺中的AR与雄激素结合，可能是通过促进了皮脂腺、汗腺过多分泌，导致原存在于皮肤上的正常菌群，如糠秕孢子菌等大量繁殖，或过量的皮脂，通过原来存在于皮肤上的非致病菌如痤疮丙酸杆菌等作用，分解出游离脂肪酸，引发毛囊周围炎性细胞浸润，诱导和加速毛发脱落，值得进一步研究证实。
参考文献
[1]肖玮.植发患者美容心理的分析与探讨[J].中外医学研究，2011，9（5）：101.
[2]中华医学会皮肤性病学分会.中国雄激素性秃发诊疗共识（2009）[J].中华皮肤科杂志，2009，42（10）：663-664.
[3]张大维.雄激素源性脱发治疗进展[J].中国美容医学，2009，18（12）：1832-1833.
[4]赵辨.中国临床皮肤病学[M].南京：江苏科技出版社，2010，1186.
[5] Matsumoto T，Shiina H，Kawano H，et al.Androgen receptor functions in male and female physiology[J].J Steroid Biochem Mol Biol，2008，109（3）：236-241.
[6] Sawant N，Chikhalkar S，Mehta V，et al.Androgenetic alopecia： quality-of-life and associated lifestyle patterns[J].Int J Trichology，2010，2（2）：81-85.
[7]谭凤明，侯显曾，张滨岳，等.男性型脱发148例临床分析[J].广东医学，2012，33（13）：1896-1897.
【关键词】 雄性激素受体； 雄性激素源性脱发
【Abstract】 Objective：To investigate AR expression in the top of epidermis， hair follicle and sebaceous gland， sudoriferous gland.Method：The top and the occipital scalp of AGA patients （n=26） and the top scalp of non-alopecia people （n=10） as specimens were obtained， and AR expressions in the epidermis， hair follicle and sebaceous gland， sudoriferous gland were studied by immunohistochemistry method.Result：AR expressions of hair follicle， sebaceous gland， sudoriferous gland on the top of AGA patients were stronger than the occipital of AGA patients and the top of non-alopecia（P<0.05）； AR expressions of hair follicle， sebaceous gland， sudoriferous gland in the occipital of AGA patients had no significant difference with the top of non-alopecia（P>0.05）. All samples were negative for AR in epidermis.Conclusion：AR expressions on the top of hair follicle and sebaceous gland， sudoriferous gland in AGA patients may be one of the key factors leading to AGA.
【Key words】 Androgen receptor； Androgenetic alopecia
First-author’s address：The First People’s Hospital of Jiujiang City，Jiujiang 332000，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.18.020
雄性激素源性脱发（Androgenetic alopecia，AGA）是临床最常见的脱发性疾病，表现为前额发际逐渐后退，顶部头发逐渐稀疏脱落。脱发不仅严重影响患者的外在形象，而且从心理上也给患者带来了无尽的烦恼，越来越受到人们的重视[1]。国内流行病学调查显示，本病在我国男性的患病率为15.73%～19.75%，女性患病率为2.73%～4.69%，其病因还不完全清楚，治疗也一直是个棘手的问题[2-3]。为探索AGA的发病原因，从而为防治提供依据，笔者对26例雄性激素源性脱发患者顶部和枕部头皮以及10例非脱发者顶部头皮标本，采用免疫组化法检测雄性激素受体（androgen receptor，AR）在表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺的表达水平，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2013年1月-2014年1月本院皮肤科门诊就诊的AGA患者26例，均为男性，年龄2l～49岁，平均（30.38±2.25）岁，病程3个月～3年。选取本院神经外科手术的非脱发患者，共10例，均为男性；年龄20～48岁，平均（29.83±1.69）岁。两组研究对象的性别、年龄比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经本院伦理委员会通过。
1.2 入选和排除标准 入选的AGA患者均具有典型临床症状，符合AGA诊断标准[4]。排除标准：（1）近半年内系统或局部使用过抗脱发药物；（2）头皮有细菌、真菌等感染性疾病。（3）伴严重心、肝、肾病、糖尿病及肿瘤等疾病者。
1.3 取材部位及方法 取AGA患者枕部和顶部皮肤标本，每块标本约2 mm×2 mm×6 mm大小，甲醛固定，深低温下保存，以备检测。非脱发者顶部头皮取自本院神经外科手术的非脱发患者废弃顶部皮肤标本。
1.4 试剂 鼠单克隆抗人AR抗体购自上海长嘉生物工程有限公司；免疫组织化学染色二步法的试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
1.5 检测方法 采取免疫组化化学二步法检测AR在AGA患者顶部、枕部和非脱发者顶部表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺的表达，具体操作步骤按照鼠单克隆抗人AR抗体和免疫组织化学二步法的试剂盒说明书操作。
1.6 结果判定 AR定位在细胞核[5]。染色结果标准参考半定量积分法：在光学显微镜下见细胞核出现棕黄色或棕褐色为阳性细胞[6]。根据阳性细胞平均百分比进行评分（A）：<10%计0分，10%～25%计1分，25%～50%计2分，>50%计3分。染色程度评分（B）：无着色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分。A+B得分0～2分者为阴性表达，3～6分者为阳性表达。 1.7 统计学处理 采用SPSS 15.0统计学软件对数据进行分析，计数资料比较采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
所有标本中表皮AR表达均为阴性。26例AGA患者中20例顶部毛囊AR表达阳性，表达率76.92%，5例枕部毛囊AR阳性，表达率19.23%，10例非脱发者顶部毛囊AR表达阳性2例，表达率20.00%，三组标本间毛囊AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=20.29，P<0.05）。AGA患者顶部毛囊AR表达与枕部毛囊AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=15.10，P<0.05），与非脱发者顶部毛囊AR表达比较差异有统计学意义（字2=7.60，P<0.05）。AGA患者枕部毛囊AR表达与非脱发者顶部毛囊AR表达比较差异无统计学意义（字2=0.17，P>0.05）。
26例AGA患者中有21例顶部皮脂腺、汗腺AR表达阳性，表达率均为80.77%；5例枕部皮脂腺、汗腺AR阳性，表达率19.23%。10例非脱发者顶部皮脂腺、汗腺AR表达阳性2例，表达率20.00%，三组标本间皮脂腺、汗腺AR表达有显著差异（ 字2=22.93，P<0.05）。AGA患者顶部皮脂腺、汗腺AR表达与枕部皮脂腺、汗腺AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=17.31，P<0.05），与非脱发者顶部皮脂腺、汗腺AR表达比较差异有统计学意义（ 字2=9.08，P<0.05）。AGA患者枕部皮脂腺、汗腺AR表达与非脱发者顶部皮脂腺、汗腺AR表达比较差异无统计学意义（ 字2=0.17，P>0.05）。
3 讨论
AGA的病因及发病机制尚未完全明了。谭凤明等[7]报道67.57%的AGA患者有家族遗传史，遗传在雄激素性脱发的发病过程中起重要作用，一般认为是常染色体显性遗传[8]。近几年研究有了一定进展，特别是对于AR基因研究，AR基因位于Xq11.2-q12，长约90 kb，是第一个发现的与雄激素脱发发生相关的基因，也是迄今为止唯一经鉴定的雄激素脱发危险基因[9]。有报道AR基因可发生缺失、剪接位点突变等改变，致靶器官对睾丸或双氢睾酮无应答[10]。AR是甾体激素受体超家族的一员，作为雄激素诱导的转录因子介导雄激素在体内的活动[11]。雄激素为固醇类化合物，男性主要来自睾丸，少量由肾上腺皮质合成；女性主要由肾上腺皮质合成，卵巢也分泌少量。睾酮是人体分泌的主要雄激素，它在体内经5α-还原酶作用可转化为活性更高的二氢睾酮（DHT），后者与其受体结合形成雄激素-受体复合物后进入细胞核，在核内控制毛发生长基因的表达，使头发的生长期缩短，头皮毛囊逐渐萎缩、微小化，终毛转变为毳毛，最终引起脱发。
笔者用免疫组化方法对毛囊中的AR受体进行检测，患者头顶部AR表达明显强于枕部和非脱发者顶部（P<0.05），并且毛囊上皮细胞中几乎没有AR受体，而AR受体存在于属真皮细胞的毛乳头细胞上，提示毛乳头是毛囊中雄激素作用的主要靶点，这与Inui等[12]用反转录聚合酶反应（RT-PCR）的方法发现AGA脱发患者局部皮肤乳头雄性激素受体比健康人高是一致的。毛乳头细胞是一种具有广泛生物学特性和功能的细胞，具有在体内外条件下重建毛囊的功能，其功能的异常变化是导致毛囊周期失衡和脱发现象的主要起始因素[13]。毛乳头细胞中的AR受体可能与睾酮、二氢睾酮结合后导致转化生长因子（TGF-β）与胰岛素生长因子（IGF-1）转录水平的变化，还可能使毛乳头细胞自分泌抑制因子，导致头皮毛囊微型化成毳毛毛囊，最后引起脱发[14-15]。雄激素通过AR所介导的细胞效应还不十分清楚，需要进一步全面深入研究。
笔者还发现AGA患者头顶部皮脂腺、汗腺AR表达较强，与枕部和非脱发者顶部AR表达比较差异有统计学意义（P<0.05），而表皮细胞中几乎没有AR表达，笔者推测AR头顶部皮脂腺、汗腺中高表达，在AGA过程中也起着一定作用。有研究发现小鼠触须毛囊上1/3切除后可促进毛囊生长，这可能是因为切除部分包括皮脂腺，皮脂腺对毛发生长有抑制作用[16]。皮脂腺、汗腺中的AR与雄激素结合，可能是通过促进了皮脂腺、汗腺过多分泌，导致原存在于皮肤上的正常菌群，如糠秕孢子菌等大量繁殖，或过量的皮脂，通过原来存在于皮肤上的非致病菌如痤疮丙酸杆菌等作用，分解出游离脂肪酸，引发毛囊周围炎性细胞浸润，诱导和加速毛发脱落，值得进一步研究证实。
参考文献
[1]肖玮.植发患者美容心理的分析与探讨[J].中外医学研究，2011，9（5）：101.
[2]中华医学会皮肤性病学分会.中国雄激素性秃发诊疗共识（2009）[J].中华皮肤科杂志，2009，42（10）：663-664.
[3]张大维.雄激素源性脱发治疗进展[J].中国美容医学，2009，18（12）：1832-1833.
[4]赵辨.中国临床皮肤病学[M].南京：江苏科技出版社，2010，1186.
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[6] Sawant N，Chikhalkar S，Mehta V，et al.Androgenetic alopecia： quality-of-life and associated lifestyle patterns[J].Int J Trichology，2010，2（2）：81-85.
[7]谭凤明，侯显曾，张滨岳，等.男性型脱发148例临床分析[J].广东医学，2012，33（13）：1896-1897.