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以GB 5413.40-2016《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》为参考,采用SUPELCO LC-18-T液相色谱柱测定核苷酸。试验调整了流动相比例,在检测波长为254 nm时,核苷酸5个组分目标峰与配方奶粉中杂质完全分开,分离效果良好。5种核苷酸浓度在1.00~10.00μg/mL范围内与其目标峰面积呈良好的线性关系(R~2≥0.99)。通过试验重现性和回收率试验等数据证明本方法稳定可靠,前处理操作简单,适合婴幼儿配方奶粉厂家推广使用。