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建立了牛奶中链霉素和双氢链霉素的超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC—MS／MS）。牛奶中的目标物经磷酸溶液提取后，分别通过苯磺酸型和羧酸型固相萃取柱净化、浓缩，再用超高效液相色谱-串联质谱仪进行测定，外标法定量。确定了链霉素和双氢链霉素的线性回归方程；方法的回收率分别为77．4％-98．2％和80．1％-95．2％，且相对标准偏差分别为5．4％-7．2％和6．4％-8．6％。该方法快速、准确，回收率高，可用于牛奶中链霉素和双氢链霉素的同时检测。