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利用PCR技术分3段克隆了长约9.7kb的牛β-酪蛋白基因,分别克隆在pGEM-T easy Vector的T位点。经NCBI Blastn分析,与牛β-酪蛋白基因相应区段的同源性为98%。这3段序列包含完整的5’侧翼序列、前8个外显子及第8个内含子的部分序列。以此构建了两个乳腺特异性表达载体:利用第1段和第2段共有的酶切位点将两段融合,作为5’调控区(6.8kb),第3段和实验室已有的600bp的加尾信号通过重组PCR拼接作为3’调控区(3.4kb)构建了一乳腺特异性表达载体;以第一段作为5’调控区,实