【摘 要】
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为探讨铜是否能诱导肝细胞发生焦亡及其发生机制,本研究通过培养鸡原代肝细胞,以不同浓度的硫酸铜(0,10,50,100μmol/L)处理细胞24h,CCK-8法检测细胞活力,实时荧光定量PCR检
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31572585)
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为探讨铜是否能诱导肝细胞发生焦亡及其发生机制,本研究通过培养鸡原代肝细胞,以不同浓度的硫酸铜(0,10,50,100μmol/L)处理细胞24h,CCK-8法检测细胞活力,实时荧光定量PCR检测细胞焦亡相关基因Caspase-1、IL-1β、IL-18、NLRP3的mRNA转录水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中焦亡相关蛋白Caspase-1、IL-1β、IL-18的含量,并使用活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)与铜共同作用于肝细胞后观察上述指标的变化。结果显示,铜可诱导细胞存活率下降(P<0.05),焦亡相关基因Caspase-1、IL-1β、IL-18和NLRP3表达显著上调(P<0.05),并促使细胞上清液中Caspase-1、IL-1β和IL-18的含量升高(P<0.05);NAC与铜联合作用可使肝细胞存活率较铜单独作用显著升高(P<0.05),焦亡相关基因表达显著下调(P<0.05),相关蛋白含量也显著降低(P<0.05)。结果表明,铜可通过活性氧诱导鸡肝细胞发生焦亡。
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