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【摘要】 目的：探讨围产期妇女阴道分泌物中无乳链球菌（GBS）的感染情况，并根据其药敏结果判断GBS的耐药情况，为临床用药提供依据。方法：对2016年6月-2017年12月到本院产检或住院的围产期妇女进行GBS检测，按年龄分为4个组：<20岁组，20～30岁组，31～40岁组，>40岁组。对各组孕妇取阴道分泌物进行培养，根据细菌形态、溶血、触酶试验、CAMP试验筛查为GBS者，需采用梅里埃ATB自动细菌鉴定及药敏分析系统进行鉴定和药物敏感性分析。结果：共检查3 055病例，检出169株GBS，其中检出例数最多的是20～30岁组为128例，其检出率也最高为6.2%，年龄段比较差异有统计学意义（P<0.05）。169株GBS药敏结果显示：对氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/达福普汀、红霉素、四环素的耐药率分别为：20.1%、24.2%、11.8%、70.4%、87.6%，未发现对青霉素、万古霉素、头孢噻肟的耐药株。结论：加强对GBS的培养检测，关注其耐药趋势，为临床用药提供更好的依据。
【关键词】 围产期妇女; 无乳链球菌; 感染; 耐药
【Abstract】 Objective：To explore the infection of group B streptococci（GBS）in the vaginal secretions of perinatal women and judge the drug resistance of GBS according to the results of antimicrobial susceptibility test，and to provide a basis for clinical medication.Method：Perinatal women received prenatal examination or hospitalized in our hospital who underwent GBS detection from June 2016 to December 2017 were divided into four groups，<20 years old group，20-30 years old group，31-40 years old group，>40 years old group.The vaginal secretions of pregnant women in each group were collected and cultured.The women who screened as GBS positive on the basis of bacterial morphology，beta hemolysis，catalase test and CAMP test needed to perform identification and drug susceptibility analysis with Merieux ATB automatic microorganism identification/ drug susceptibility analysis system.Result：Totally 3 055 cases were examined and 169 strains of GBS were detected.The positive number was the highest in the 20-30 years group（128 cases），and similar result was found in the detection rate（6.2%），which suggested that the age had statistically significant difference（P<0.05）.The drug susceptibility results of 169 strains of GBS revealed that the drug resistance rate to Chloroamphenicol，Levofloxacin，Quinupristin/ Dalfopristin，Erythromycin and Tetracycline were 20.1%，24.2%，11.8%，70.4%，87.6%，respectively.GBS strain resistant to penicillin，vancomycin or cefotaxime was not found.Conclusion：Enhancing of the GBS culture detection and concerning of the trend of drug resistance of GBS can offer a preferable foundation for clinical medication.
【Key words】 Perinatal women; Group B streptococci; Infection; Drug resistance
First-author’s address：Maternal and Child Care Service Center of Yunfu City，Yunfu 527300，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.07.039
無乳链球菌（GBS）是一种条件致病菌，多寄生于女性生殖道和直肠，当孕妇免疫力下降，GBS可经产道上行导致子宫和胎膜感染，从而引起孕妇早产、流产、新生儿发育不良等，GBS也可通过垂直传播，导致新生儿脑膜炎、肺炎、败血症等疾病[1-3]。目前，在国外GBS已被证实是围产期严重感染性疾病的主要病原菌，但在我国对其尚未引起足够重视[4]。GBS严重感染导致胎儿、新生儿死亡的病例也有报道[5]。但通过对围产期妇女进行GBS筛查，及时使用抗菌药物，可有效减少围产期的母婴感染。本研究对2016年6月～2017年12月到本院产检或住院的围产期妇女进行无乳链球菌检测的，分析其不同年龄阶段GBS的感染情况和总体的耐药情况，为临床用药提供更好的依据。 1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株来源 收集2016年6月-2017年12月到本院产检或住院的围产期妇女阴道分泌物标本，剔除同一患者的重复菌株后共3 055份标本。3 055例孕妇按年龄进行分组，<20岁组126例，20～30岁组2 051例，31～40岁组812例，>40岁组66例。（1）纳入标准：①患者同意作为研究项目的分析对象;②符合孕周要求;③能够自主配合相关调查及研究，且思维和表达能力正常者。（2）排除标准：①孕周不符者;②阴道出血者;③采样前一个月内接受过抗菌药物治疗者;④采样前24 h内接受过阴道清洗、药膏治疗者;⑤不能完成治疗或不愿意参加本研究者。本研究取得所有孕妇的知情同意，经过伦理委员会批准。
1.1.2 仪器和试剂 梅里埃ATB自动细菌鉴定及药敏分析系统，5%二氧化碳培养箱，5%哥伦比亚羊血琼脂平板，3%过氧化氢溶液，质控标准菌株（金黄色葡萄球菌ATCC25923、无乳链球菌ATCC12386）。
1.2 方法
1.2.1 样本采集 由临床医生采集生殖道分泌物标本，孕妇在采样前一个月内未使用过任何抗菌药物，采样前24 h内未接受过阴道清洗和治疗，使用消毒窥阴器扩张阴道，用无菌棉拭子采取阴道下1/3处黏膜分泌物，将棉拭子放回无菌套管中，立刻送检。
1.2.2 检测方法 将临床采集的标本直接接种于血平板，置35 ℃、5%二氧化碳培养箱培养18～48h，观察培养基生长情况，挑取可疑菌落用3%过氧化氢溶液进行触酶试验，对结果阴性者进行CAMP试验，指示菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923，CAMP试验阳性者，通过梅里埃ATB自动细菌鉴定及药敏系统进行鉴定和药敏分析。
1.2.3 治疗措施 根据药物敏感性测试结果结合患者自身体质选择合理抗菌药物进行治疗。
1.3 统计学处理 使用WPS表格建立数据库，采用SPSS 22.0软件进行数据处理，计数资料以率（%）表示。
2 结果
2.1 不同年龄段感染率情况 3 055例孕妇中，
169例GBS培养阳性，感染率为5.5%。其中20～30岁组GBS检出率最高为6.2%，31～40岁组检出率次之为4.7%，<20岁组检出率为1.6%，>40岁组检出率最低为1.5%。见表1。
2.2 药敏结果 分离出的169株GBS对青霉素、万古霉素、头孢噻肟高度敏感，无中介或耐药现象;对氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/达福普汀、红霉素、四环素的耐药率分别为：20.1%、24.2%、11.8%、70.4%、87.6%;敏感率分别为：79.9%、73.4%、88.2%、29.6%、12.4%。见表2。
3 讨论
GBS作为一种条件病原菌，是一种有荚膜的革兰阳性球菌，围产期GBS感染会导致妊娠不良结局[6]。GBS传播的主要途径为垂直传播，且与分娩有关，如果孕妇感染GBS，新生儿就可能在出生时吸入感染的羊水或经产道感染[7]。据美国CDC统计，产妇感染GBS的发病率为10%～30%，其中40%～70%的感染孕妇在分娩过程中将GBS传播至新生儿，1%～3%的带菌新生儿早期即可出现侵入性感染，感染患儿的病死率约为5%[8]。因此，对围产期妇女进行GBS检测并干预是减少母婴严重感染的有效手段，而我国多数地区并未将GBS筛查作为孕产妇的常规检查，使得国内与孕妇GBS相关的流行病学资料缺乏。目前，国外很多国家已经将孕晚期妇女GBS检测纳入产前常规筛查项目，以保证孕产妇和胎儿的健康。
近年来，孕妇围产期GBS的篩查逐渐受到了重视，我国各地关于妊娠妇女GBS检出率的报道差异较大，上海、江西、南京、深圳和东莞报道的孕妇检出率分别为6.30%、10.21%、4.17%、4.50%和9.10%[9-13]，本次研究围产期妇女GBS的检出率为5.5%。研究结果显示，围产期不同年龄组GBS的感染情况存在显著差异（字2=8.890，P=0.031），检出例数最多的是20～30岁组为128例，其感染率也最高为6.2%，此年龄段的检查总人数最多，符合临床实际情况。围产期GBS感染集中在20～30岁组，原因可能在于此年龄组妇女为生育旺盛期育龄妇女，性生活相对活跃、雌激素水平相对较高，阴道的微生态环境易受影响，从而导致GBS更容易定植。
目前预防围产期GBS感染的主要措施是使用抗菌药物，对携带GBS的孕产妇应采取积极有效的治疗方案。GBS通常对青霉素敏感，是临床的首选用药，但随着抗菌药物的应用增多，现在已经出现了耐药菌株[14-15]。本研究分离出的169株GBS研究表明，对青霉素、万古霉素、头孢噻肟类抗菌药物具有高度敏感性，因万古霉素具有一定的肝肾毒性和较多不良反应而不适合孕妇使用，头孢噻肟为第三代头孢菌素，它的使用会增加细菌的选择压力导致耐药株的出现，故不作为一线用药，青霉素过敏者可以选用，因此建议在本地区除过敏患者外，青霉素可作为孕产妇治疗GBS的首选药。GBS对氯霉素的敏感率虽然高达79.9%，但该药会引起灰婴综合征，不适合孕妇使用。对喹奴普汀/达福普汀的耐药率也较低为11.8%，但该种抗生素有多种副作用为孕妇禁用药。本次研究，红霉素的耐药率高达70.4%，和省内周边三个地区的报道相近[8，13，16]，这与临床干预孕龄妇女常见的生殖道支原体及细菌性感染，广泛应用大环内酯类抗生素如：阿奇霉素、克拉霉素等药物有密切的关系[17]。红霉素不良反应较小且便宜，对青霉素过敏患者经药敏试验敏感后可选用红霉素。左氧氟沙星的耐药率为24.2%，相比其他一些地区耐药率不算高，但左氧氟沙星对新生儿的软骨发育有一定的影响，为孕妇禁用药。本研究结果还显示，无乳链球菌对四环素的耐药率最高（87.6%），与国内外其他研究报道的四环素耐药率普遍达到90%以上相比略低[18-19]，但它可引起胎儿牙齿变色，牙釉质再生不良及抑制胎儿骨骼生长，该类药物为孕妇禁用药。临床治疗围产期妇女感染GBS，可以根据药敏试验结果合理选择敏感药物。对于GBS筛查阴性或孕期未进行GBS筛查的产妇，如出现胎膜早破或分娩时发热（>38 ℃）时，应采集新生儿血液或脑脊液，或采集咽、耳、胎粪及胃抽吸液等进行培养或快速鉴定，对筛查阳性者应积极、规范治疗[20]。 综上所述，随着二胎生育的到来，围产期妇女开展GBS的预防性筛查工作可有效防止新生儿GBS感染，保护产妇及胎儿健康。围产期妇女感染GBS首选青霉素治疗，或根据药物敏感性测试结果结合患者自身体质选择合理抗生素治疗，做到早预防、早发现、早治疗，以降低对孕产妇及新生儿的危害。关注GBS耐药趋势，预防新耐药菌株的出现，为临床用药提供更好的依据。
参考文献
[1]史兴泉，吴文华，王莹超.围产期孕妇泌尿生殖道无乳链球菌耐药性分析及临床意义[J].中国微生态学杂志，2013，25（8）：966-968.
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[3]林爱心，袁春雷，汪伟山，等.孕妇无乳链球菌的感染及药物敏感性分析[J].当代医学，2015，21（7）：115-116.
[4]钟媛媛，周潔琼.武汉市孕妇B族链球菌感染与妊娠结局的关系[J].中国妇幼保健，2016，31（1）：33-34.
[5]魏超平，李敏.新生儿无乳链球菌败血症8例临床分析并文献复习[J].中国医学创新，2014，11（34）：147-150.
[6]孙丹华，王李利，张磊，等.妊娠35～37周孕妇B族链球菌带菌与妊娠结局[J].中国妇产科临床杂志，2013，14（4）：312-314.
[7]李金丽，宋晓光.B群链球菌两种检测方法的比较[J].临床输血与检验，2018，20（1）：89-91.
[8]陆少颜，徐烨，陈泳言，等.江门市围产期妇女B族链球菌的分布及耐药情况[J].中国妇幼保健，2016，31（7）：1383-1385.
[9]侯雅萍，俞菁，樊程.上海长宁地区孕晚期B族链球菌感染及耐药情况分析[J].检验医学与临床，2018，15（14）：2132-2133+2136.
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[12]曹雪莲，温国明，颜春荣，等.深圳市孕妇B族链球菌携带与影响因素分析[J].现代预防医学，2018，45（11）：1986-1991.
[13]张丽华，杨维青，张丽，等.广东东莞地区2009-2014年围产期孕妇B群链球菌的分离与耐药性分析[J].中国感染与化疗杂志，2015，15（6）：575-578.
[14]吕磊，吴海军，汪俊，等.围产期孕妇阴道B群链球菌感染及其药敏实验研究[J].国际检验医学杂志，2015，36（12）：1784-1785.
[15]许爱霞，余跃华，舒向荣，等.围产期孕妇B群链球菌感染的检测及耐药性分析[J].实验与检验医学，2015，33（1）：46-47.
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[17]杨玮，詹碧翠，楼正青.我院2005-2011年无乳链球菌的药物敏感性分析[J].实用医技杂志，2014，21（02）：139-140.
[18]高晶，刘晓艳.女性泌尿生殖道无乳链球菌的耐药性分析[J].检验医学，2015，30（1）：13-16.
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[20]王双杰，岑贞娇，曾尚娟，等.孕晚期孕妇与婴儿B群链球菌感染情况分析[J].广西医学，2017，39（12）：1925-1927，1942.
（收稿日期：2018-10-15） （本文编辑：周亚杰）
【关键词】 围产期妇女; 无乳链球菌; 感染; 耐药
【Abstract】 Objective：To explore the infection of group B streptococci（GBS）in the vaginal secretions of perinatal women and judge the drug resistance of GBS according to the results of antimicrobial susceptibility test，and to provide a basis for clinical medication.Method：Perinatal women received prenatal examination or hospitalized in our hospital who underwent GBS detection from June 2016 to December 2017 were divided into four groups，<20 years old group，20-30 years old group，31-40 years old group，>40 years old group.The vaginal secretions of pregnant women in each group were collected and cultured.The women who screened as GBS positive on the basis of bacterial morphology，beta hemolysis，catalase test and CAMP test needed to perform identification and drug susceptibility analysis with Merieux ATB automatic microorganism identification/ drug susceptibility analysis system.Result：Totally 3 055 cases were examined and 169 strains of GBS were detected.The positive number was the highest in the 20-30 years group（128 cases），and similar result was found in the detection rate（6.2%），which suggested that the age had statistically significant difference（P<0.05）.The drug susceptibility results of 169 strains of GBS revealed that the drug resistance rate to Chloroamphenicol，Levofloxacin，Quinupristin/ Dalfopristin，Erythromycin and Tetracycline were 20.1%，24.2%，11.8%，70.4%，87.6%，respectively.GBS strain resistant to penicillin，vancomycin or cefotaxime was not found.Conclusion：Enhancing of the GBS culture detection and concerning of the trend of drug resistance of GBS can offer a preferable foundation for clinical medication.
【Key words】 Perinatal women; Group B streptococci; Infection; Drug resistance
First-author’s address：Maternal and Child Care Service Center of Yunfu City，Yunfu 527300，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.07.039
無乳链球菌（GBS）是一种条件致病菌，多寄生于女性生殖道和直肠，当孕妇免疫力下降，GBS可经产道上行导致子宫和胎膜感染，从而引起孕妇早产、流产、新生儿发育不良等，GBS也可通过垂直传播，导致新生儿脑膜炎、肺炎、败血症等疾病[1-3]。目前，在国外GBS已被证实是围产期严重感染性疾病的主要病原菌，但在我国对其尚未引起足够重视[4]。GBS严重感染导致胎儿、新生儿死亡的病例也有报道[5]。但通过对围产期妇女进行GBS筛查，及时使用抗菌药物，可有效减少围产期的母婴感染。本研究对2016年6月～2017年12月到本院产检或住院的围产期妇女进行无乳链球菌检测的，分析其不同年龄阶段GBS的感染情况和总体的耐药情况，为临床用药提供更好的依据。 1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株来源 收集2016年6月-2017年12月到本院产检或住院的围产期妇女阴道分泌物标本，剔除同一患者的重复菌株后共3 055份标本。3 055例孕妇按年龄进行分组，<20岁组126例，20～30岁组2 051例，31～40岁组812例，>40岁组66例。（1）纳入标准：①患者同意作为研究项目的分析对象;②符合孕周要求;③能够自主配合相关调查及研究，且思维和表达能力正常者。（2）排除标准：①孕周不符者;②阴道出血者;③采样前一个月内接受过抗菌药物治疗者;④采样前24 h内接受过阴道清洗、药膏治疗者;⑤不能完成治疗或不愿意参加本研究者。本研究取得所有孕妇的知情同意，经过伦理委员会批准。
1.1.2 仪器和试剂 梅里埃ATB自动细菌鉴定及药敏分析系统，5%二氧化碳培养箱，5%哥伦比亚羊血琼脂平板，3%过氧化氢溶液，质控标准菌株（金黄色葡萄球菌ATCC25923、无乳链球菌ATCC12386）。
1.2 方法
1.2.1 样本采集 由临床医生采集生殖道分泌物标本，孕妇在采样前一个月内未使用过任何抗菌药物，采样前24 h内未接受过阴道清洗和治疗，使用消毒窥阴器扩张阴道，用无菌棉拭子采取阴道下1/3处黏膜分泌物，将棉拭子放回无菌套管中，立刻送检。
1.2.2 检测方法 将临床采集的标本直接接种于血平板，置35 ℃、5%二氧化碳培养箱培养18～48h，观察培养基生长情况，挑取可疑菌落用3%过氧化氢溶液进行触酶试验，对结果阴性者进行CAMP试验，指示菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923，CAMP试验阳性者，通过梅里埃ATB自动细菌鉴定及药敏系统进行鉴定和药敏分析。
1.2.3 治疗措施 根据药物敏感性测试结果结合患者自身体质选择合理抗菌药物进行治疗。
1.3 统计学处理 使用WPS表格建立数据库，采用SPSS 22.0软件进行数据处理，计数资料以率（%）表示。
2 结果
2.1 不同年龄段感染率情况 3 055例孕妇中，
169例GBS培养阳性，感染率为5.5%。其中20～30岁组GBS检出率最高为6.2%，31～40岁组检出率次之为4.7%，<20岁组检出率为1.6%，>40岁组检出率最低为1.5%。见表1。
2.2 药敏结果 分离出的169株GBS对青霉素、万古霉素、头孢噻肟高度敏感，无中介或耐药现象;对氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/达福普汀、红霉素、四环素的耐药率分别为：20.1%、24.2%、11.8%、70.4%、87.6%;敏感率分别为：79.9%、73.4%、88.2%、29.6%、12.4%。见表2。
3 讨论
GBS作为一种条件病原菌，是一种有荚膜的革兰阳性球菌，围产期GBS感染会导致妊娠不良结局[6]。GBS传播的主要途径为垂直传播，且与分娩有关，如果孕妇感染GBS，新生儿就可能在出生时吸入感染的羊水或经产道感染[7]。据美国CDC统计，产妇感染GBS的发病率为10%～30%，其中40%～70%的感染孕妇在分娩过程中将GBS传播至新生儿，1%～3%的带菌新生儿早期即可出现侵入性感染，感染患儿的病死率约为5%[8]。因此，对围产期妇女进行GBS检测并干预是减少母婴严重感染的有效手段，而我国多数地区并未将GBS筛查作为孕产妇的常规检查，使得国内与孕妇GBS相关的流行病学资料缺乏。目前，国外很多国家已经将孕晚期妇女GBS检测纳入产前常规筛查项目，以保证孕产妇和胎儿的健康。
近年来，孕妇围产期GBS的篩查逐渐受到了重视，我国各地关于妊娠妇女GBS检出率的报道差异较大，上海、江西、南京、深圳和东莞报道的孕妇检出率分别为6.30%、10.21%、4.17%、4.50%和9.10%[9-13]，本次研究围产期妇女GBS的检出率为5.5%。研究结果显示，围产期不同年龄组GBS的感染情况存在显著差异（字2=8.890，P=0.031），检出例数最多的是20～30岁组为128例，其感染率也最高为6.2%，此年龄段的检查总人数最多，符合临床实际情况。围产期GBS感染集中在20～30岁组，原因可能在于此年龄组妇女为生育旺盛期育龄妇女，性生活相对活跃、雌激素水平相对较高，阴道的微生态环境易受影响，从而导致GBS更容易定植。
目前预防围产期GBS感染的主要措施是使用抗菌药物，对携带GBS的孕产妇应采取积极有效的治疗方案。GBS通常对青霉素敏感，是临床的首选用药，但随着抗菌药物的应用增多，现在已经出现了耐药菌株[14-15]。本研究分离出的169株GBS研究表明，对青霉素、万古霉素、头孢噻肟类抗菌药物具有高度敏感性，因万古霉素具有一定的肝肾毒性和较多不良反应而不适合孕妇使用，头孢噻肟为第三代头孢菌素，它的使用会增加细菌的选择压力导致耐药株的出现，故不作为一线用药，青霉素过敏者可以选用，因此建议在本地区除过敏患者外，青霉素可作为孕产妇治疗GBS的首选药。GBS对氯霉素的敏感率虽然高达79.9%，但该药会引起灰婴综合征，不适合孕妇使用。对喹奴普汀/达福普汀的耐药率也较低为11.8%，但该种抗生素有多种副作用为孕妇禁用药。本次研究，红霉素的耐药率高达70.4%，和省内周边三个地区的报道相近[8，13，16]，这与临床干预孕龄妇女常见的生殖道支原体及细菌性感染，广泛应用大环内酯类抗生素如：阿奇霉素、克拉霉素等药物有密切的关系[17]。红霉素不良反应较小且便宜，对青霉素过敏患者经药敏试验敏感后可选用红霉素。左氧氟沙星的耐药率为24.2%，相比其他一些地区耐药率不算高，但左氧氟沙星对新生儿的软骨发育有一定的影响，为孕妇禁用药。本研究结果还显示，无乳链球菌对四环素的耐药率最高（87.6%），与国内外其他研究报道的四环素耐药率普遍达到90%以上相比略低[18-19]，但它可引起胎儿牙齿变色，牙釉质再生不良及抑制胎儿骨骼生长，该类药物为孕妇禁用药。临床治疗围产期妇女感染GBS，可以根据药敏试验结果合理选择敏感药物。对于GBS筛查阴性或孕期未进行GBS筛查的产妇，如出现胎膜早破或分娩时发热（>38 ℃）时，应采集新生儿血液或脑脊液，或采集咽、耳、胎粪及胃抽吸液等进行培养或快速鉴定，对筛查阳性者应积极、规范治疗[20]。 综上所述，随着二胎生育的到来，围产期妇女开展GBS的预防性筛查工作可有效防止新生儿GBS感染，保护产妇及胎儿健康。围产期妇女感染GBS首选青霉素治疗，或根据药物敏感性测试结果结合患者自身体质选择合理抗生素治疗，做到早预防、早发现、早治疗，以降低对孕产妇及新生儿的危害。关注GBS耐药趋势，预防新耐药菌株的出现，为临床用药提供更好的依据。
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（收稿日期：2018-10-15） （本文编辑：周亚杰）