【摘 要】
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目的制备LINE1-ORF1p多克隆抗体,研究LINE1-ORF1p过表达对肾母细胞瘤细胞WT_CLS1增殖的影响。方法利用基因工程方法原核表达LINE1-ORF1p,免疫家兔制备多克隆抗体。间接ELISA
【机 构】
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首都儿科研究所生化免疫科,首都儿科研究所病理科
【基金项目】
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国家自然科学基金(81301773);首都儿科研究所方向性引导基金(FX-2016-3)
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目的制备LINE1-ORF1p多克隆抗体,研究LINE1-ORF1p过表达对肾母细胞瘤细胞WT_CLS1增殖的影响。方法利用基因工程方法原核表达LINE1-ORF1p,免疫家兔制备多克隆抗体。间接ELISA法检测抗体效价,通过Western blot及免疫组化方法检测抗体对LINE1-ORF1p的特异性识别能力。构建真核表达载体p EGFP-N1-LINE1-ORF1,转染WT_CLS1细胞,通过Western blot和q RT-PCR检测LINE1-ORF1蛋白和基因的表达情况,采用细胞增殖实验和平板
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