寡肽转运蛋白是植物中重要的转运蛋白,对植物抵抗非生物胁迫以及形态和发育具有重要的作用。本研究从紫花苜蓿中克隆得到MsOPT1基因,将其连接至表达载体pCBM,并对烟草和拟南芥进行遗传转化,为研究MsOPT1基因的功能奠定基础。主要研究结果如下:1.MsOPT1基因的克隆与序列分析根据拟南芥AtOPT基因的氨基酸序列在蒺藜苜蓿基因组数据库中进行检索,获得同源序列设计引物,克隆基因并命名为MsOPT1。该基因共有411个核苷酸,编码136个氨基酸,不含内含子,有一个OPT结构域。2.pCBM-MsOPT1载体构建构建了pCBM-MsOPT1植物表达载体,载体上带有植物选择标记Bar基因以及CaMV35S启动子。3.MsOPT1基因对烟草的遗传转化通过农杆菌介导的叶盘法对烟草进行转化,对转基因烟草进行抗性筛选。PCR和RT-PCR鉴定证实获得了带有MsOPT1基因的阳性转基因烟草植株。4.转基因烟草的表型分析qRT-PCR实验结果显示,MsOPT1基因在转基因植株中高量表达。相对野生型烟草,转基因烟草发生了明显的表型变化。MsOPT1转基因植株的叶绿素含量,铁含量均高于野生型烟草。铁胁迫下,转基因烟草种子的发芽率高于野生型烟草、根长长于野生型烟草。5.MsOPT1基因对拟南芥的遗传转化花序侵染法转化拟南芥,草丁膦抗性筛选,获得转MsOPT1基因拟南芥T0、T1植株。