固始鸡△6-脂肪酸脱氢酶基因片段的克隆及序列分析

来源 :第十三届全国家禽学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:alyue_wang
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△6-脂肪酸脱氢酶是生成一系列不饱和脂肪酸的限速酶。根据GenBank上公布的预测鸡△6-脂肪酸脱氢酶基因序列XM421053设计引物进行RT-PCR,获得一个1323bp的cDNA片段。将所得到的片段同鹌鹑、普通牛、猕猴、猩猩等的△6-脂肪酸脱氢酶基因核苷酸序列进行同源性比较,同源性分别为94.69%、76.11%、75.28%、74.83%,氨基酸序列同源性分别为93.37%、78.78%、76.03%、76.94%。因而认为所克隆的片段就是鸡的△6-脂肪酸脱氢酶。已将该序列成功提交GenBank,登录号为:EF636888。
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为进一步研究鸵鸟的防御素基因的功能和生物学活性。参照克隆得到的鸵鸟防御素cDNA片段,通过选用大肠杆菌偏好密码子对鸵鸟防御素基因进行改造,人工合成鸵鸟防御素基因,将成熟肽序列重组到表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达载体pGEX-4T-1-Defensin,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,从而采用在大肠杆菌中表达外源蛋白的方法,进行了鸵鸟防御素原核表达的研究。结果表明重组蛋白经变性复
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